[发明专利]一种固定红发夫酵母及制备新科思糖的方法及应用

摘要

本发明公开了一种固定红发夫酵母及制备新科思糖的方法及应用。本发明通过将生理盐水分散均匀的红发夫酵母菌悬液与海藻酸钠溶液混匀，再滴加到氯化钙溶液中静置钙化，固液分离，洗涤固体，接着将固体转到壳聚糖溶液中覆膜，洗涤，得到固定化细胞；最后将该固定化细胞置于摇瓶或反应器中进行转化，得到新科思糖。该方法具有如下优点克服了游离细胞易失活的缺点；在传统的海藻酸钙包埋方法的基础上，引入壳聚糖覆膜，提高了固定化颗粒的机械强度和稳定性；利用固定化细胞转化蔗糖产新科思糖，连续运行30天，360个批次，新科思糖产量维持在50.7g/L，新科思糖的产量无明显降低。因此，本发明提供的方法有利于工业化生产。

主权项

一种固定红发夫酵母及制备新科思糖的方法，其特征在于包括如下步骤：(1)红发夫酵母菌悬液的制备：用生理盐水将红发夫酵母菌体分散均匀，得到红发夫酵母菌悬液；(2)固定化细胞的制备：将步骤(1)制备的红发夫酵母菌悬液与海藻酸钠溶液混匀，再滴加到氯化钙溶液中静置钙化，固液分离，洗涤固体，接着将固体转到壳聚糖溶液中覆膜，洗涤，得到固定化细胞；(3)固定化细胞的转化：取步骤(2)所得的固定化细胞置于摇瓶或反应器中进行转化，得到新科思糖；步骤(1)中所述的红发夫酵母菌悬液对应的干菌体浓度为40mg/mL；步骤(2)中所述的海藻酸钠溶液的浓度为质量体积比3％；步骤(2)中所述的氯化钙溶液为0.2mol/L、pH＝6的氯化钙溶液；步骤(2)中所述的壳聚糖溶液的浓度为质量体积比1％；所述的红发夫酵母菌悬液和所述的海藻酸钠溶液按体积比1：2配比；所述的红发夫酵母菌悬液和所述的氯化钙溶液按体积比1：30配比；所述的红发夫酵母菌悬液和所述的壳聚糖溶液按体积比1：15配比；步骤(2)中所述的钙化的时间为30min；步骤(2)中所述的覆膜的时间为15min。