[发明专利]叶酸靶向水飞蓟素固体脂质纳米粒制备方法

摘要

本发明涉及一种叶酸靶向水飞蓟素固体脂质纳米粒制备方法，它是首先将叶酸-聚乙二醇3350-脑磷脂进行合成，再将叶酸修饰的水飞蓟素固体脂质体纳米粒进行制备。该发明将水飞蓟素制成固体脂质纳米粒并连接靶头叶酸，纳米粒静脉注射后具有靶向肺部的作用，叶酸修饰可使药物靶向肿瘤细胞，因此产生肺部肿瘤靶向作用，提高抗肿瘤药物的生物利用度，减少细胞毒副作用，治疗效果好，使患者能够减少痛苦，早日康复，本发明制备方法简便，对环境无污染，成本低，有利于推广应用。

主权项

一种叶酸靶向水飞蓟素固体脂质纳米粒制备方法，其特征在于：将水飞蓟素制成固体脂质纳米粒并连接靶头叶酸，制成叶酸靶向的水飞蓟宾固体脂质纳米粒，第一步、FA‑PEG3350‑DSPE（叶酸‑聚乙二醇3350‑脑磷脂）的合成合成步骤如下：①分别称取65.8mgFA（叶酸）、350mgH₂N‑PEG3350‑NH₂（二氨基‑聚乙二醇3350）、30mgNHS（羟基琥珀酸酰亚胺）、60mgDCC（N，N′‑二环己基碳二亚胺）溶解于1mLDMSO（二甲基亚砜）中，依次加入，加入100μL TEA（三乙胺），N₂（氮气）保护、避光反应24h后50℃（500r·min^‑1）反应6h，加入45mL冷氯仿混匀，旋转蒸发去除氯仿，残留少许液体，真空干燥得淡黄色固体FA‑PEG3350‑NH₂（氨基‑叶酸‑聚乙二醇3350），②50mgDSPE（脑磷脂）溶于2.5mLCHCl₃（三氯甲烷），15mgSUC（琥珀酸酐）溶于0.5mlDMSO（二甲基亚砜），转入前一体系①中，逐渐加入50μL TEA（三乙胺），500 r·min^‑1室温反应24h，残留少许液体，加入45mL无水冷丙酮沉淀，离心（12000 r·min^‑1，10min），反复清洗沉淀3次，真空干燥得SUC‑DSPE（琥珀酸脑磷脂），③将SUC‑DSPE（琥珀酸脑磷脂）溶解在10mLCHCl₃（三氯甲烷）中，加入30mgDCC（N，N′‑二环己基碳二亚胺）室温反应4h活化羧基，称取200mgFA‑PEG3350‑NH₂（氨基‑叶酸‑聚乙二醇3350）溶解在10mL的CHCl₃（三氯甲烷）中后转入前一体系②中，加入40μL TEA，室温反应24h，冷丙酮沉淀并清洗产物，得产物FA‑PEG3350‑DSPE（叶酸‑聚乙二醇3350‑脑磷脂）；第二步、叶酸修饰的水飞蓟素固体脂质体纳米粒制备2.0%单硬脂酸甘油酯加入少量无水乙醇助融，10mg水飞蓟宾，水浴加热70℃熔融，作为油相，油相中加入3%膜材（溶于氯仿），称取2.4%泊洛沙姆188，加入20mL蒸馏水超声溶解，称取0.8%脑磷脂，加入少量无水乙醇超声溶解后加入泊洛沙姆188中，作为水相，将水相加热至同温度后以10ml·min^‑1的速度滴加至油相中，乳化10min后超声破碎（600w，8min,3s间隔），置于4℃水浴中固化，0.22μm滤膜过滤即得叶酸修饰水飞蓟宾固体脂质纳米粒（FA‑SIL‑SLN）。