[发明专利]一种制备利西拉来的方法

摘要

本发明涉及一种制备利西拉来的方法，采用片段缩合方法合成利西拉来，具体采用片段20‑44肽树脂与片段15‑19进行固相缩合，然后逐步偶联剩余氨基酸至固相合成结束。与常规的逐步偶联相比，提高了粗肽纯度和纯化收率。

主权项

一种制备利西拉来的方法，包括以下步骤：(1)将Fmoc‑Lys(Boc)‑OH与树脂偶联，得到Fmoc‑Lys(Boc)‑Resin；(2)采用Fmoc保护氨基酸，按照固相合成操作，依利西拉来氨基酸顺序进行依次偶联，得到利西拉来全保护20‑44片段肽树脂；(3)采用固相合成方法合成全保护片段15‑19肽树脂(即Fmoc‑Glu(OtBu)‑Glu(OtBu)‑Glu(OtBu)‑Ala‑Val‑Resin)，然后裂解得到全保护肽片段15‑19(即Fmoc‑Glu(OtBu)‑Glu(OtBu)‑Glu(OtBu)‑Ala‑Val‑OH)；(4)将所得全保护片段15‑19(即Fmoc‑Glu(OtBu)‑Glu(OtBu)‑Glu(OtBu)‑Ala‑Val‑OH)与全保护片段20‑44肽树脂(即H‑Arg(pbf)‑Leu‑Phe‑Ile‑Glu(OtBu)‑Trp(Boc)‑Leu‑Lys(Boc)‑Asn(Trt)‑Gly‑Gly‑Pro‑Ser(tBu)‑Ser(tBu)‑Gly‑Ala‑Pro‑Pro‑Ser(tBu)‑Lys(Boc)‑Lys(Boc)‑Lys(Boc)‑Lys(Boc)‑Lys(Boc)‑Lys(Boc)‑Resin)偶联得到全保护片段15‑44肽树脂(即Fmoc‑Glu(OtBu)‑Glu(OtBu)‑Glu(OtBu)‑Ala‑Val‑Arg(pbf)‑Leu‑Phe‑Il e‑Glu(OtBu)‑Trp(Boc)‑Leu‑Lys(Boc)‑Asn(Trt)‑Gly‑Gly‑Pro‑Ser(tBu)‑Ser(tBu)‑Gly‑Ala‑Pro‑Pro‑Ser(tBu)‑Lys(Boc)‑Lys(Boc)‑Lys(Boc)‑Lys(Boc)‑Lys(Boc)‑Lys(Boc)‑Resin)；(5)依利西拉来肽序逐步偶联其余氨基酸至固相合成结束；(6)裂解利西拉来肽树脂，得到粗肽；(7)采用RP‑HPLC方法纯化，最终得到利西拉来纯品。