[发明专利]一种通过添加葡萄糖酸提高乙偶姻产量的方法有效
申请号: | 201410748883.4 | 申请日: | 2014-12-09 |
公开(公告)号: | CN104404089B | 公开(公告)日: | 2018-02-23 |
发明(设计)人: | 饶志明;包腾;张显;赵晓静;杨套伟;徐美娟 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12P7/26 | 分类号: | C12P7/26;C12R1/125 |
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地址: | 214122 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 添加葡萄糖酸提高乙偶姻产量的方法,属于发酵工程领域。利用本实验室前期筛选得到的高产乙偶姻野生型枯草芽孢杆菌B.subtilis JNA(保藏号CCTCC M209309;专利申请公布号CN 101864381A)进行发酵,通过调节葡萄糖与葡萄糖酸的比例改变胞内辅酶变化水平从而改变乙偶姻与2,3‑丁二醇比例。最终在较低NADH浓度及NADH/NAD+比例下(50g/L葡萄糖和50g/L葡萄糖酸),转化约为55.8g/L的乙偶姻,副产物2,3‑丁二醇仅为4.1g/L;与使用葡萄糖作为唯一碳源相比较,乙偶姻生产效率上升到0.78g/(L·h),乙偶姻产量提高近86%,副产物2,3‑丁二醇积累量下降80%。为国内外首次利用混合还原态底物降低NADH浓度及其NADH/NAD+比例发酵生产乙偶姻,实现了提高生产效率、减少NADH依赖型副产物的目的。 | ||
搜索关键词: | 一种 通过 添加 葡萄糖 提高 乙偶姻 产量 方法 | ||
【主权项】:
一种发酵策略在发酵生产乙偶姻中的应用,其特征是:所述策略为利用葡萄糖和葡萄糖酸作为混合碳源发酵生产乙偶姻;具体的,将保藏编号为CTCCM 209309的B.subtilis JNA接种于10mL LB培养基中,37℃振荡培养7‑9h后,取1mL转接于2瓶50mL含40g/L葡萄糖的LB培养基中37℃振荡培养,当培养至OD600=5.0‑6.0时,加入含1.9L发酵培养基的5L发酵反应器中培养,最终发酵72h;所述的发酵培养基的配方为:牛肉浸膏5g/L,玉米浆20g/L,尿素2g/L,50g/L葡萄糖和50g/L葡萄糖酸,去离子水配置,pH 6.5。
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