[发明专利]利用交叉引物和双探针恒温扩增检测牛肉源成分的方法

摘要

本发明公开了属于食品质量控制检测方法领域的用于交叉引物和双探针恒温扩增检测牛肉源成分的引物组，该引物组由一对外围引物、一对交叉引物和一对检测探针引物组成，具体由SEQ ID No：1-SEQ ID No：6所示的核苷酸序列组成。本发明还公开了含有上述引物组的检测试剂盒，以及利用交叉引物和双探针恒温扩增检测牛肉源成分的方法。本发明引物组特异性强，只能用于检测牛肉源成分，与其他羊肉、鼠肉、鸡肉等肉类的基因无交叉反应，灵敏度高；其次，本发明方法检测速度快，检测效率高；此外不需要复杂仪器设备，仅用恒温水浴即可，方便实用，扩增产物通过试纸条进行检测结果的判读，尤其适用在基层现场检测。

主权项

用于交叉引物和双探针恒温扩增检测牛源性成分的引物组，其特征在于由一对外围引物、一对交叉引物和一对检测探针引物组成；其中所述的一对外围引物为：正向外围引物BOS4s：5’‑CGATAAGGGCTACGAGAGG‑3’(SEQ ID No:1)，反向外围引物BOS5a：5’‑AGATCATTGTCAGTCATGTTG‑3’(SEQ ID No:2)；所述的交叉引物为：正向交叉引物BOS2a1s：5’‑TGGGAAAAATAGTAGAAAGTTGATTGTTGGTGTCAGTTCTGGATT G‑3’(SEQ ID No:3)，反向交叉引物BOS1s2a：5’‑TTGTTGGTGTCAGTTCTGGATTGTGGGAAAAATAGTAGAAAGTT GA‑3’(SEQ ID No:4)，所述一对检测探针引物为：检测探针引物BOS1s2a*：5’‑TTGTTGGTGTCAGTTCTGGATTGTGGGAAAAATAGTAGAAAGTTGA‑3’(SEQ ID No:5)，检测探针引物BOSHP*：5’‑ATTTCCAACACAAAACT‑3’(SEQ ID No:6)；其中BOS1s2a*的5’端标记修饰生物素，BOSHP*的5’端标记修饰荧光素FAM。