[发明专利]一种天然二硫键与阿魏酸酯酶A功能相关性的验证方法在审
申请号: | 201410758070.3 | 申请日: | 2014-12-10 |
公开(公告)号: | CN104404066A | 公开(公告)日: | 2015-03-11 |
发明(设计)人: | 邬敏辰;殷欣;姚瑶;李剑芳;胡蝶;吴芹 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N15/55 | 分类号: | C12N15/55;C12N9/18;C12N15/81;C12N1/19;C12R1/84 |
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地址: | 214122 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明的目的是提供一种天然二硫键与阿魏酸酯酶A功能相关性的验证方法,以及突变阿魏酸酯酶A工程菌构建、突变酶异源表达的方法。根据来源于A.usamii E001阿魏酸酯酶A(AuFaeA)的模拟空间结构设计单突变C29T、C91T和C234T,得到突变阿魏酸酯酶A:AuFaeAC29T、AuFaeAC91T和AuFaeAC234T,其成熟肽基因序列为SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:5。突变后该酶的酶活性和最适温度都有大幅下降,证明了二硫键是影响阿魏酸酯酶A功能发挥的关键因素,为其它与AuFaeA一级结构相似的A类阿魏酸酯酶的耐热性改造奠定了基础。 | ||
搜索关键词: | 一种 天然 二硫键 阿魏酸 功能 相关性 验证 方法 | ||
【主权项】:
一种改造后的源自宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001的阿魏酸酯酶A基因AufaeAC29T、AufaeAC91T和AufaeAC234T,其对应的核苷酸和蛋白质序列分别为SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6。
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