[发明专利]一种液体植酸酶的制备方法

摘要

本发明公开了一种液体植酸酶的制备方法，属于植酸酶制备技术领域。无须添加化学防腐剂，无须低温处理，将微生物来源的植酸酶发酵液和含植酸酶活性较高的麦芽提取液混合发酵得到发酵粗酶液，进一步提高了植酸酶的酶活力，在常温下对发酵粗酶液和调配浓缩液采用高压脉冲电场处理，并在调配过程添加果胶分解物、中草药提取物、改性膳食纤维等天然植物原料，然后除菌过滤、无菌灌装即得一种酶活力高、稳定性强的液体植酸酶。试验证明本发明制备的液体植酸酶在室温储存12个月菌落总数为66-92CFU/mL；在40℃和0℃条件下储存12个月，酶活损失率分别为1-1.4％和0.5-0.9％。制备方法工艺简单、操作方便，节能环保。

主权项

一种液体植酸酶的制备方法，包括如下步骤：1)将发酵后获得的植酸酶发酵液与麦芽提取液按质量比5‑10:2‑4均匀混合，28‑35℃发酵15‑24h,搅拌速度120‑180r/m，通风量1‑3vvm,得到混合发酵液；2)向混合发酵液中添加100目‑300目硅藻土，用500‑800目滤布预涂硅藻土，采用板框过滤机进行过滤，操作压力为0.14‑0.24Mpa，得发酵粗酶液；所述硅藻土的添加量为每100mL发酵液添加0.8‑1.2g；3)将发酵粗酶液于室温下在电场强度30‑35kV/cm，脉冲时间300‑500μs,脉冲频率200‑300Hz条件下进行高压脉冲电场处理；4)步骤3)经高压脉冲电场处理的发酵粗酶液依次通过孔径为0.4‑0.8μm的微滤膜微滤和孔径为0.005‑0.015μm的超滤膜超滤，然后循环超滤得到浓缩酶液；所述微滤进口压力为0.1‑0.12MPa，压差0.07‑0.09MPa，酶液温度25‑30℃；所述超滤进口压力为0.15‑0.20MPa，压差0.08‑0.10MPa，酶液温度25‑35℃；5)向浓缩酶液中加入其质量5‑12％的稳定剂，充分搅拌，均匀混合，用乳酸调节pH值2.5‑5.5，然后于室温下在电场强度35‑40kV/cm，脉冲时间400‑600μs,脉冲频率200‑300Hz条件下进行高压脉冲电场处理，静置20‑40min；6)步骤5)经调配、静置后的浓缩酶液经除菌过滤、无菌灌装即得稳定的液体植酸酶；步骤5)中所述稳定剂的制备方法如下：按重量份数计，准确称取果胶分解物20‑30份，中草药提取物20‑30份，改性膳食纤维10‑15份，海藻糖8‑12份，天然抗氧化剂5‑10份，多元醇2‑5份，金属氯化物1‑3份，牛血清白蛋白0.1‑0.3份；首先取改性膳食纤维，加入其质量5‑12倍的去离子水，室温浸泡4‑6h,边升温边搅拌，40‑60℃保温20‑30min,搅拌，充分溶解，继续保温，边搅拌边依次加入果胶分解物、中草药提取物、海藻糖、多元醇、金属氯化物，然后降温至25‑35℃，边搅拌边依次加入牛血清白蛋白、天然抗氧化剂均匀混合即得稳定剂。