[发明专利]一种改进的细胞化学融合方法在审
| 申请号： | 201410783452.1 | 申请日： | 2014-12-16 |
| 公开（公告）号： | CN105754986A | 公开（公告）日： | 2016-07-13 |
| 发明（设计）人： | 周涛;孙卫兵;张跃建 | 申请（专利权）人： | 上海复星长征医学科学有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/06 | 分类号： | C12N15/06 |
| 代理公司： | 上海新天专利代理有限公司 31213 | 代理人： | 王巍 |
| 地址： | 200444 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种改进的细胞化学融合方法，采用“两步法”化学PEG融合。(1)融合前将A细胞和B细胞以2:1至10:1的比列混合于50ml融合管内。向融合管内的松散细胞团滴加0.5ml 50％PEG4000(2)滴加0.5ml 50％PEG1500。最后细胞团于融合管内静置30s至1min，终止融合作用，整个融合过程均在37℃水浴中进行。整个过程消耗50％PEG溶液1ml，总融合时间1.5至2min。本发明所述的细胞融合方法，适用于同种属的或者具有相近亲缘关系两株细胞如Balb/C小鼠B淋巴细胞与SP2/0骨髓瘤细胞等之间的融合，可用于制备单克隆抗体或细胞因子等生物大分子，有较大的应用价值。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 改进 细胞 化学 融合 方法 | ||
【主权项】：
一种改进的细胞化学融合方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：(1)将A细胞与B细胞两株细胞混合置于细胞融合管，向融合管内的细胞团滴加0.5ml 50％PEG3000～4000溶液，20秒内完成，边加边晃动细胞团，以使细胞团充分接触融合剂PEG溶液；(2)接着滴加0.5ml 50％PEG1500～2500溶液，40秒内完成，边加边晃动融合管，以使细胞团充分接触融合剂PEG溶液；(3)细胞团于融合管内静置30s至1min，用20～30mlDMEM或PRMI1640终止融合。
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