[发明专利]一种酶法降解几丁质生产N‑乙酰氨基葡萄糖的方法

摘要

本发明公开了一种酶法降解几丁质生产N‑乙酰氨基葡萄糖的方法，包括以下步骤步骤1，微生物发酵产几丁质酶；步骤2，粗酶液的获得；步骤3，浓缩酶液；步骤4，生产N‑乙酰氨基葡萄糖。本发明首次提出一种酶法降解几丁质生产N‑乙酰氨基葡萄糖的方法，该方法中产酶培养基成本低廉，生产周期短；浓缩酶液所用材料可重复再利用，操作过程简单，酶活回收率高；降解过程中采取了防止染菌措施，实现了以低价值的几丁质为原料高效率迅速生产具有高医疗价值N‑乙酰氨基葡萄糖的目的，具有显著的经济效益和社会效益。

主权项

一种酶法降解几丁质生产N‑乙酰氨基葡萄糖的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1，微生物发酵产几丁质酶选产几丁质酶的菌株作为种子，在37℃、200 rpm下培养得种子液，再以体积分数5%~10%接种量接入装有产酶发酵培养基的发酵罐，装液量40~60%，培养温度24℃~37℃，转速为200~500 rpm，通气量1vvm~3vvm，初始pH7.0~8.0，发酵72~96h后收集发酵液；步骤2，粗酶液的获得将步骤1获得的发酵液低温高速离心，分离菌体，收集上清液，得到几丁质酶粗酶液，低温贮存，备用；步骤3，浓缩酶液将步骤2中所得到的几丁质酶粗酶液，低温透析浓缩得到浓缩酶液，测粗酶液和浓缩酶液酶活，计算回收率；步骤4，生产N‑乙酰氨基葡萄糖利用步骤3中获得的浓缩酶液无菌转化几丁质，其中，转化体系的温度为25‑37℃，搅拌速度为200 rpm，转化24‑72 h，液相法检测N‑乙酰氨基葡萄糖浓度；其中，步骤3，浓缩用变色硅胶或无色硅胶与变色硅胶的混合物；浓缩温度为4℃，浓缩时间2‑12h。