[发明专利]一种提高乌塌菜小孢子胚胎发生率的方法在审
| 申请号： | 201410788526.0 | 申请日： | 2014-12-17 |
| 公开（公告）号： | CN104429969A | 公开（公告）日： | 2015-03-25 |
| 发明（设计）人： | 汪承刚;邹明倩;朱世东;袁凌云;赵冠艳;程圆;刘姗;葛继涛;管超 | 申请（专利权）人： | 安徽农业大学 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 安徽汇朴律师事务所 34116 | 代理人： | 汪蕙 |
| 地址： | 230036 *** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种提高乌塌菜小孢子胚胎发生率的方法，该方法将易出胚的花蕾与难出胚或弱出胚的花蕾混合培养，利用B5提取液提取，在1/2NLN-13培养基中诱导胚胎发生，相比于现有技术的单一培养，能够有效诱导难出胚品种产胚率和提高弱出胚品种的胚胎发生率和植株再生率，解决了弱出胚品种的胚胎发生率和出胚基因型比率低的技术问题，同时解决了难出胚品种无法利用小孢子培养的方式获得植株的技术障碍，对乌塌菜小孢子培养具有重要意义。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 提高 乌塌菜小 孢子 胚胎 发生率 方法 | ||
【主权项】：
一种提高乌塌菜小孢子胚胎发生率的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)同时选择易出胚品种、难出胚品种/弱出胚品种的乌塌菜植株的盛花期花蕾，将易出胚品种的花蕾与难出胚品种/弱出胚品种的花蕾混合，洗净后，置于4℃下预处理24h，再对混合的花蕾进行消毒，获得消毒后的花蕾，其中，所述易出胚品种为出胚率高于2个胚/蕾的乌塌菜品种，难出胚品种为出胚率为0的乌塌菜品种，弱出胚品种为介于易出胚品种和难出胚品种之间的乌塌菜品种；(2)将步骤(1)的消毒后的花蕾加入pH5.8的B5提取液中进行提纯，获得提纯后的小孢子；(3)将步骤(2)的提纯后的小孢子悬浮在pH5.8的1/2NLN‑13培养基中，33℃下热激12h后，室温下静置暗培养，得到肉眼可见的胚状体；(4)将步骤(3)的胚状体振荡培养，获得子叶型胚；将子叶型胚经过分化培养和生根培养，获得再生植株。
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