[发明专利]全细胞生物转化制备L-2-氨基丁酸的方法在审
| 申请号： | 201410793186.0 | 申请日： | 2014-12-20 |
| 公开（公告）号： | CN104531793A | 公开（公告）日： | 2015-04-22 |
| 发明（设计）人： | 郁庆明 | 申请（专利权）人： | 郁庆明 |
| 主分类号： | C12P13/00 | 分类号： | C12P13/00;C12R1/19 |
| 代理公司： | 江阴市同盛专利事务所(普通合伙) 32210 | 代理人： | 唐纫兰;隋玲玲 |
| 地址： | 214434 江苏省无锡*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种全细胞生物转化制备L-2-氨基丁酸的方法。所述方法是：将苏氨酸脱氨酶和亮氨酸脱氢酶串联表达，克隆氯霉素抗性的表达载体上，实现二个酶在同一细菌中共表达；甲酸酶克隆到卡拉霉素抗性pET-28a载体上进行表达，和大肠杆菌中辅酶I代谢途径中限速步骤的pcnB基因串联表达，实现二个酶的高表达；将二种抗性的表达载体，转化到同一个细菌里进行共表达，实现了四个酶，在同一属主菌里的表达；用大肠杆菌发酵表达含有四种酶的大肠杆菌用全细胞，实现从苏氨酸到L-2-氨基丁酸的生物还原转化。本发明使得在转化体系内，不需要添加辅酶就可以实现2-酮基丁酸的高效转化，成本低、方法简单。 | ||
| 搜索关键词： | 细胞 生物转化 制备 氨基 丁酸 方法 | ||
【主权项】：
一种全细胞生物转化制备L‑2‑氨基丁酸的方法，其特征在于，所述方法是：将苏氨酸脱氨酶和亮氨酸脱氢酶串联表达，克隆氯霉素抗性的表达载体上，实现二个酶在同一细菌中共表达；甲酸酶克隆到卡拉霉素抗性pET‑28a载体上进行表达，和大肠杆菌中辅酶I代谢途径中限速步骤的pcnB基因串联表达，实现二个酶的高表达；将二种抗性的表达载体，转化到同一个细菌里进行共表达，实现了四个酶，在同一属主菌里的表达；用大肠杆菌发酵表达含有四种酶的大肠杆菌用全细胞，实现从苏氨酸到L‑2‑氨基丁酸的生物还原转化。
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