[发明专利]一种一步法诱导烟草单倍体植株的方法

摘要

本发明属于烟草育种和植物组培技术领域，具体涉及一种一步法诱导烟草单倍体植株的方法。该方法包括以下步骤：（1）低温预处理花蕾、（2）消毒灭菌、（3）接种于改良MS培养基培养等步骤。本发明诱导获得烟草单倍体的技术思路是：花药脱分化→形成胚状体→直接形成完整花粉植株。由于这种培养方式更接近于植物体的发育过程，因而诱导单倍体植株的频率较高，从一个花药上可以诱导出多个花粉植株；同时采用本发明获得单倍体植株所需诱导时间较短，可以在一个月的时间里得到单倍体植株，整体的培养步骤操作也较为简便，因而在烟草杂交培育育种方面具有较好的推广应用价值。

主权项

一种一步法诱导烟草单倍体植株的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：（1）从烟草花序上选取无病虫、生长良好、花冠刚刚伸出花萼的花蕾，花萼长度不超过1cm，将取好的花蕾迅速低温预处理，备用；（2）将步骤（1）中低温预处理后的花蕾，消毒灭菌，获得无菌花药；（3）将步骤（2）中消毒后的无菌花药接种于改良MS培养基上25~27℃培养，所述改良MS培养基为含有40g/L蔗糖的MS基本培养基；步骤（1）中所述烟草是指NC1071或中烟100与云烟87的杂交F1品种；步骤（2）中所述消毒灭菌采用体积分数为70~75%的酒精进行消毒灭菌50~70s；步骤（3）中所述培养分为暗培养和光培养两个过程，接种后首先于无光条件下暗培养10~14 d，然后转到弱光条件下培养至烟草小植株，所述弱光条件为每天光照8~10h，光照强度50~100 lx。