[发明专利]副猪嗜血杆菌血清分型PCR方法有效

专利信息
申请号: 201410823091.9 申请日: 2014-12-24
公开(公告)号: CN104561283A 公开(公告)日: 2015-04-29
发明(设计)人: 贾爱卿;刘琪;王悦芸;周如月;安欣宇;王贵平 申请(专利权)人: 广东海大畜牧兽医研究院有限公司
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C12Q1/04;C12R1/21
代理公司: 广州市越秀区哲力专利商标事务所(普通合伙) 44288 代理人: 汤喜友
地址: 510000 广东省广州市番*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 发明通过比较副猪嗜血杆菌荚膜合成基因簇上的保守基因,并分析各血清型之间保守基因的差别,为15个血清型各设计多对引物,并从中各筛选一对作为血清分型PCR引物,并建立鉴别副猪嗜血杆菌15个血清分型PCR方法。本发明提供了一种准确度高、灵敏度高、特异性强的副猪嗜血杆菌血清分型PCR方法。
搜索关键词: 嗜血 杆菌 血清 pcr 方法
【主权项】:
副猪嗜血杆菌血清分型PCR方法,包括以下步骤,1)引物设计:比对副猪嗜血杆菌的荚膜合成基因簇上的保守基因序列,为15种血清型分别对应设计一对引物,作为血清分型PCR引物;2)PCR扩增:以副猪嗜血杆菌15种血清型的参考菌株的基因组DNA为模板,以无菌双蒸水或超纯水为阴性对照,分别用上述设计的15对PCR引物进行PCR扩增;3)凝胶成像:PCR扩增产物经1%琼脂糖凝胶电泳,凝胶成像系统观察每条引物扩增的目的条带,记录目的条带信息;4)菌株检测:以待测菌株的基因组DNA为模版,以无菌双蒸水或超纯水为阴性对照,分别用上述15对PCR引物扩增,电泳凝胶成像,与参考菌株的目的条带信息进行比对,进行血清分型鉴别。
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