[发明专利]一种仿刺参种质鉴定方法有效
| 申请号： | 201410826860.0 | 申请日： | 2014-12-25 |
| 公开（公告）号： | CN104404166A | 公开（公告）日： | 2015-03-11 |
| 发明（设计）人： | 陈百尧;伏光辉;薛学坤;安健;张庆起;张立祥;董志国;孙苗苗 | 申请（专利权）人： | 连云港市海洋与水产科学研究所;连云港赣榆佳信水产开发有限公司;连云港帅森海水养殖专业合作社;淮海工学院 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 连云港润知专利代理事务所 32255 | 代理人： | 刘喜莲 |
| 地址： | 222000 江苏省*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明是一种仿刺参种质鉴定方法，所述的鉴定方法步骤如下：（1）样本提取：将疑似仿刺参样本，随机取样，加液氮在研砵中研成粉末，分装到2mLEP管中；提取DNA；（2）PCR鉴定；（3）鉴定标准：产物8%聚丙烯酰胺凝胶电泳2.5h，银染显色后扫描仪成像；引物Aja2-111的结果为111bp的一条带；引物Aja13-144的结果为144bp的一条带；引物Aja15-185的结果为185bp和384bp的2条带；（4）结果判定：用引物扩增出如步骤（3）所述的条带时，判定样本是仿刺参。本发明方法设计合理，操作方便快捷，准确度高，有效地克服现有经验性鉴定和利用刺参分类专家才可鉴定的缺陷。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 刺参 种质 鉴定 方法 | ||
【主权项】：
一种仿刺参种质鉴定方法，其特征在于，所述的鉴定方法步骤如下：(1)样本提取：将疑似仿刺参样本，随机取样5g，加液氮在研砵中研成粉末，取0.05g分装到2mL EP管中，取样至少3支；在不能即时提取DNA时，则‑20℃保存备用；按常规的酚氯仿法提取DNA，或者用深加工食品DNA提取试剂盒按操作指南提取DNA；(2)PCR鉴定：反应条件：15μl体系：模板 0.2μl2×Taq PCR MasterMix 7.5μl引物 1.2μl，上下游引物均为2.5μmol/LddH2O 6.1μlPCR反应程序：![]()
引物序列：![]()
(3)鉴定标准：产物8％聚丙烯酰胺凝胶电泳2.5h，银染显色后扫描仪成像；引物Aja2‑111的结果为111bp的一条带；引物Aja13‑144的结果为144bp的一条带；引物Aja15‑185的结果为185bp和384bp的2条带；(4)结果判定：用步骤(2)所述的3对引物扩增出如步骤(3)所述的条带时，判定样本是仿刺参。
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