[发明专利]一种简便有效的悬浮细胞扩培操作方法有效
| 申请号： | 201410836525.9 | 申请日： | 2014-12-29 |
| 公开（公告）号： | CN104560863B | 公开（公告）日： | 2018-07-17 |
| 发明（设计）人： | 贺炜华 | 申请（专利权）人： | 佛山安普泽生物医药股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 广州新诺专利商标事务所有限公司 44100 | 代理人： | 李国钊;刘婉 |
| 地址： | 528231 广东省佛山市南海区狮山镇3*** | 国省代码： | 广东;44 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明提供了一种悬浮细胞扩培操作方法，其步骤如下：1)复苏一支293F细胞，加入到37℃水浴预热的培养基中，放入CO2培养箱培养；2)进行第一次扩培：取20ml细胞悬浮液，向细胞悬浮液中倒入80g培养基，旋紧培养瓶盖，放入CO2体积浓度为8％、37℃、转速140rpm的二氧化碳培养箱中培养；3)进行第二次扩培：将新的2L培养瓶旋开瓶盖后放入天平上清零，倒入400g的培养基，再清零天平，继续倒入100g悬浮细胞液，旋紧培养瓶盖，细胞放入CO2体积浓度为8％、37℃、转速140rpm的二氧化碳培养箱中培养；4)进行第三次扩培。本发明的方法简便有效。 | ||
| 搜索关键词： | 扩培 放入 瓶盖 培养基 二氧化碳培养箱 细胞悬浮液 悬浮细胞 清零 旋紧 天平 细胞 培养瓶 细胞液 预热的 水浴 旋开 悬浮 复苏 | ||
【主权项】：
1.一种简便有效的悬浮细胞扩培操作方法，其步骤如下：1）复苏一支293F细胞，加入到37℃水浴预热的40 ml培养基中，放入CO2培养箱培养；2）进行第一次扩培：取20 ml细胞悬浮液，向细胞悬浮液中倒入80 g培养基，旋紧培养瓶盖，放入CO2体积浓度为8%、37℃、转速140 rpm的二氧化碳培养箱中培养；3）进行第二次扩培：将新的2 L培养瓶旋开瓶盖后放入天平上清零，倒入400g的培养基，再清零天平，继续倒入100 g悬浮细胞液，旋紧培养瓶盖，细胞放入CO2体积浓度为8%、37℃、转速140 rpm的二氧化碳培养箱中培养；4）进行第三次扩培：将新的3 L培养瓶旋开瓶盖后放入天平上清零，倒入2000g的培养基，再清零天平，继续倒入500 g悬浮细胞液，旋紧培养瓶盖混匀，再将一个新的3 L培养瓶旋开瓶盖后放入天平上清零，将混匀的细胞倒入1250 g到新的3 L培养瓶，旋紧瓶盖，两瓶细胞一起放入CO2体积浓度为8%、37℃、转速140 rpm的二氧化碳培养箱中培养；所述步骤1）中，CO2培养箱的培养条件为： CO2体积浓度为8%、37℃、摇床转速140 rpm；所述步骤1）中，细胞培养3天；所述培养基为FreeStyle™ 293 Expression Medium，Gibco 12338。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于佛山安普泽生物医药股份有限公司，未经佛山安普泽生物医药股份有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201410836525.9/，转载请声明来源钻瓜专利网。
