[发明专利]改变型羰基还原酶及其基因有效
申请号: | 201480018198.4 | 申请日: | 2014-03-25 |
公开(公告)号: | CN105073991B | 公开(公告)日: | 2019-04-05 |
发明(设计)人: | 松井美里;伊藤纪幸;川野茂;八十原良彦 | 申请(专利权)人: | 株式会社钟化 |
主分类号: | C12N15/09 | 分类号: | C12N15/09;C12N1/21;C12N9/02;C12P7/02 |
代理公司: | 北京市柳沈律师事务所 11105 | 代理人: | 沈雪 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | 本发明的课题在于,提供一种改变型羰基还原酶和/或生产该酶的转化体,所述改变型羰基还原酶改变在有机溶剂存在下反应性降低的野生型酶,与野生型酶相比,有机溶剂存在下的反应性提高。本发明人等从在野生型酶基因上随机地导入变异而制作的变异型酶库中发现与野生型酶相比存在有机溶剂下的反应性提高的改变型羰基还原酶,直至完成本发明。 | ||
搜索关键词: | 变型 羰基 还原酶 及其 基因 | ||
【主权项】:
1.一种多肽,其显示以下(a)~(c)的性质:(a)由序列表的序列号1中引入了氨基酸取代的氨基酸序列组成的多肽,其中所述氨基酸取代是序列表的序列号1中记载的氨基酸序列中的下述氨基酸取代之一:(1)第71号被取代为天冬酰胺、第195号被取代为亮氨酸;(2)第71号被取代为精氨酸、第259号被取代为谷氨酸;(3)第71号被取代为精氨酸、第270号被取代为蛋氨酸;(4)第71号被取代为精氨酸、第300号被取代为天冬氨酸;(5)第102号被取代为异亮氨酸、第270号被取代为蛋氨酸;(6)第177号被取代为苯基丙氨酸、第220号被取代为缬氨酸;(7)第226号被取代为甘氨酸、第270号被取代为蛋氨酸;(8)第257号被取代为丝氨酸、第259号被取代为谷氨酸;(9)第257号被取代为丝氨酸、第270号被取代为蛋氨酸;(10)第259号被取代为谷氨酸、第270号被取代为蛋氨酸;(11)第259号被取代为谷氨酸、第300号被取代为天冬氨酸;(12)第267号被取代为脯氨酸、第270号被取代为蛋氨酸;(13)第270号被取代为蛋氨酸、第300号被取代为天冬氨酸;(14)第2号被取代为异亮氨酸、第259号被取代为谷氨酸、第270号被取代为蛋氨酸;(15)第45号被取代为天冬氨酸、第175号被取代为天冬氨酸、第183号被取代为苏氨酸;(16)第102号被取代为异亮氨酸、第226号被取代为甘氨酸、第267号被取代为脯氨酸;(17)第124号被取代为亮氨酸、第259号被取代为谷氨酸、第270号被取代为蛋氨酸;(18)第177号被取代为苯基丙氨酸、第259号被取代为谷氨酸、第270号被取代为蛋氨酸;(19)第220号被取代为缬氨酸、第259号被取代为谷氨酸、第270号被取代为蛋氨酸;(20)第236号被取代为天冬酰胺、第259号被取代为谷氨酸、第270号被取代为蛋氨酸;(21)第238号被取代为异亮氨酸、第259号被取代为谷氨酸、第270号被取代为蛋氨酸;(22)第257号被取代为丝氨酸、第259号被取代为谷氨酸、第270号被取代为蛋氨酸;(23)第301号被取代为半胱氨酸;(24)第259号被取代为谷氨酸、第265号被取代为赖氨酸、第270号被取代为蛋氨酸;(25)第259号被取代为谷氨酸、第270号被取代为蛋氨酸、第300号被取代为天冬氨酸;(26)第259号被取代为谷氨酸、第270号被取代为蛋氨酸、第301号被取代为半胱氨酸;(27)第2号被取代为异亮氨酸、第238号被取代为异亮氨酸;(28)第195号被取代为亮氨酸、第259号被取代为谷氨酸、第270号被取代为蛋氨酸;(29)第109号被取代为甘氨酸、第331号被取代为苯基丙氨酸;(30)第124号被取代为亮氨酸、第236号被取代为天冬酰胺;(31)第159号被取代为苯基丙氨酸、第259号被取代为谷氨酸;(32)第42号被取代为精氨酸、第155号被取代为精氨酸、第279号被取代为精氨酸;(33)第22号被取代为精氨酸、第87号被取代为异亮氨酸、第259号被取代为谷氨酸、第270号被取代为蛋氨酸;(34)第155号被取代为亮氨酸、第250号被取代为脯氨酸、第298号被取代为脯氨酸;(35)第56号被取代为赖氨酸、第138号被取代为天冬酰胺、第190号被取代为丝氨酸、第254号被取代为天冬酰胺;(36)第90号被取代为甘氨酸、第259号被取代为谷氨酸、第270号被取代为蛋氨酸;(37)第39号被取代为精氨酸、第51号被取代为丙氨酸、第259号被取代为谷氨酸、第270号被取代为蛋氨酸;(38)第22号被取代为精氨酸;(39)第25号被取代为苯基丙氨酸;(40)第135号被取代为丙氨酸;(41)第155号被取代为亮氨酸;(42)第195号被取代为亮氨酸;(43)第212号被取代为苯基丙氨酸、苏氨酸或酪氨酸;(44)第228号被取代为缬氨酸;(45)第257号被取代为丝氨酸;(46)第259号被取代为谷氨酸;(47)第265号被取代为赖氨酸;(48)第267号被取代为脯氨酸;和(49)第270号被取代为蛋氨酸;(b)还原2‑戊酮而生成2‑戊醇;和(c)与由序列表的序列号1中记载的氨基酸序列构成的羰基还原酶相比,在存在有机溶剂下对羰基化合物的反应性高、和/或热稳定性高。
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