[发明专利]在大肠杆菌的细胞质和/或培养基中表达真人类表皮生长因子和/或碱性成纤维细胞生长因子的手段和方法有效
申请号: | 201480020051.9 | 申请日: | 2014-02-25 |
公开(公告)号: | CN105143451B | 公开(公告)日: | 2020-02-14 |
发明(设计)人: | 允强·R·黄 | 申请(专利权)人: | 允强·R·黄 |
主分类号: | C12N15/72 | 分类号: | C12N15/72 |
代理公司: | 11283 北京润平知识产权代理有限公司 | 代理人: | 严政;李婉婉 |
地址: | 中国香港*** | 国省代码: | 中国香港;81 |
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摘要: | 本发明涉及一种生物工程系统,特别是大肠杆菌宿主。所述宿主整合有DNA构建体组合用来生产至少第一多肽。第一多肽可以是真碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)。DNA构建体中有插入片段,该插入片段包括,例如,按顺序,表达盒、内含肽和编码第一多肽的DNA。所述DNA构建体被配置为影响宿主胞内分泌碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在宿主的细胞质中和/或外排到培养宿主的细胞培养基中。 | ||
搜索关键词: | 大肠杆菌 细胞质 培养基 表达 人类 表皮 生长因子 碱性 纤维 细胞 手段 方法 | ||
【主权项】:
1.一种DNA构建体,所述DNA构建体用于在宿主大肠杆菌(Escherichia coli)中生产至少真碱性成纤维细胞生长因子的第一多肽,其中,所述DNA构建体包括插入片段,该插入片段在5’-3’方向上包括表达盒、编码真人类表皮生长因子的DNA、Sce VMA内含肽序列、编码真碱性成纤维细胞生长因子的DNA,其中,所述表达盒在5’-3’方向上包括启动子序列、操纵子序列、用于共有核糖体结合位点的序列和ompA前导序列,所述DNA构建体被配置成使宿主以真实、切割、非融合且成熟真碱性成纤维细胞生长因子和真人类表皮生长因子的形式表达碱性成纤维细胞生长因子和人类表皮生长因子到宿主的细胞质中并外排到培养宿主的细胞培养基中。/n
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