[发明专利]大鼠的遗传修饰有效
| 申请号： | 201480021152.8 | 申请日： | 2014-02-20 |
| 公开（公告）号： | CN105121631B | 公开（公告）日： | 2019-04-19 |
| 发明（设计）人： | J·D·李;W·奥尔巴克;D·赫斯林;D·弗伦德维;K·V·莱;D·M·瓦伦泽拉 | 申请（专利权）人： | 瑞泽恩制药公司 |
| 主分类号： | C12N5/07 | 分类号： | C12N5/07;C12N5/10;C12N5/00;C12N5/02 |
| 代理公司： | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人： | 郝传鑫 |
| 地址： | 美国*** | 国省代码： | 美国;US |
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| 摘要： | 提供了用于制备包括大鼠胚胎干(ES)细胞的大鼠多能细胞和全能细胞的组合物和方法。提供了用于改善大鼠中遗传修饰的生殖系传递效率或频率的组合物和方法。此类方法和组合物包括了含饲养细胞层以及大鼠ES细胞群或大鼠ES细胞系的体外培养物，其中所述体外培养条件维持所述ES细胞的多能性并且包含了具有小鼠白血病抑制因子(LIF)或者其活性变体或片段的培养基。还提供了建立此类大鼠ES细胞系的各种方法。还提供了选择遗传修饰的大鼠ES细胞的方法，以及由本文所提供的遗传修饰的大鼠ES细胞产生转基因大鼠的各种方法。另外提供了各种试剂盒和制品。 | ||
| 搜索关键词： | 大鼠 遗传 修饰 | ||
【主权项】：
1.一种体外培养物，其包含：(a)饲养细胞层，所述饲养细胞层未被修饰成表达白血病抑制因子(LIF)；(b)培养基，所述培养基包含50U/mL至150U/mL的LIF及由MEK抑制剂和GSK3抑制剂组成的抑制剂组合，其中所述培养基不包含ESRF；以及(c)大鼠胚胎干(ES)细胞群，其中所述大鼠ES细胞：(i)被修饰以包含靶向遗传修饰，所述靶向遗传修饰包括所述大鼠ES细胞的基因组中异源多核苷酸的至少一个插入，并且能够通过生殖系传递所述靶向遗传修饰；(ii)缺乏c‑Myc的表达；(iii)具有正常的核型；(iv)在培养物中形成球状、自由漂浮的集落。
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