[发明专利]脲酶米氏常数测定方法在审
| 申请号： | 201510004502.6 | 申请日： | 2015-01-06 |
| 公开（公告）号： | CN104697990A | 公开（公告）日： | 2015-06-10 |
| 发明（设计）人： | 盛桂华;陈相飞;胡晓明;徐英;韩艳伟;陈杰;王峰;朱海亮 | 申请（专利权）人： | 山东理工大学 |
| 主分类号： | G01N21/78 | 分类号： | G01N21/78 |
| 代理公司： | 无 | 代理人： | 无 |
| 地址： | 255086 山东省淄博*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种脲酶米氏常数测试方法即脲酶-酚红法，属于生物化学和应用酶学技术领域。本发明所提供的测试方法是以一系列不同浓度的尿素溶液为底物，酚红为指示剂，在脲酶的作用下，尿素分解产氨，pH值上升，在酚红指示剂的作用下，体系的颜色变深，吸光度增加，用分光光度计或酶标仪测吸光度。酶促反应速率与吸光度值的增加成正比，因此可以用吸光度增加值的倒数1/△A代替双倒数方程1/V=Km/（Vmax[S]）+1/Vmax中的1/V，对底物尿素浓度的倒数1/[S]作图，根据双倒数方程可得直线在X轴上的截距即为-1/Km，求得Km值。 | ||
| 搜索关键词： | 脲酶 常数 测定 方法 | ||
【主权项】：
一种脲酶米氏常数测试方法，其特征在于：以一系列不同浓度的尿素为底物，酚红为指示剂，脲酶分解尿素产氨，pH值上升，在酚红指示剂的作用下，体系的颜色变深，吸光度的增加，吸光度的增加与酶促反应速度成正比，以吸光度的增加代表反应速度，用吸光度增加值的倒数1/△A代替双倒数方程中的1/V，对底物尿素浓度的倒数1/[S]作图，根据双倒数方程1/V=Km/（Vmax[S]）+1/Vmax可得直线在X轴上的截距即为‑1/Km，求得Km值。
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