[发明专利]基于量子点标记的结直肠癌细胞的检测方法和试剂盒

摘要

本发明公开了一种基于量子点标记的结直肠癌细胞的检测方法及试剂盒，其包括步骤：制备抗人M2型丙酮酸激酶的单克隆抗体过程、量子点荧光探针的制备过程和往结直肠癌细胞加入量子点荧光探针，并在共聚焦荧光显微镜下观察结直肠癌细胞的荧光图像；通过量子点标记抗人M2型丙酮酸激酶的单克隆抗体可组成液态芯片或免疫荧光检测结直肠癌细胞或蛋白免疫诊断试剂盒，该试剂盒具有灵敏度高和特异性好的优点，并且能快速、准确检测及能检测分泌物包括粪便和血清能够极大的提高结直肠癌的检测准确度。

主权项

一种基于量子点标记的结直肠癌细胞的检测方法，其特征在于，包括步骤：A：制备抗人M2型丙酮酸激酶的单克隆抗体过程小鼠免疫：以基因重组M2型丙酮酸激酶蛋白为抗原结合等体积的弗氏完全佐剂对第一小鼠和第二小鼠进行免疫；杂交瘤细胞株生成：取血清抗体效价达1×10⁶以上的小鼠，无菌取小鼠脾脏制成细胞悬液与对数生长期的小鼠骨髓瘤细胞株混合形成组合液，将聚乙二醇溶液加入所述组合液，产生抗人M2型丙酮酸激酶的单克隆抗体的杂交瘤细胞并选取强阳性杂交瘤细胞进行克隆化，获得一株M2丙酮酸激酶33.26的杂交瘤细胞株和一株M2丙酮酸激酶31.1的杂交瘤细胞株；单克隆抗体生成：在第一小鼠体内接种M2丙酮酸激酶33.26的杂交瘤细胞株制备腹水获得单克隆抗体33.26，在第二小鼠体内接种M2丙酮酸激酶31.1的杂交瘤细胞株制备腹水获得得到单克隆抗体31.3；B：量子点荧光探针的制备过程对QD 605溶液进行量子点活化；经过量子点活化的QD 605的溶液与抗人M2型丙酮酸激酶的单克隆抗体通过非共价偶联形成量子点荧光探针；C：往结直肠癌细胞加入量子点荧光探针，并在共聚焦荧光显微镜下观察结直肠癌细胞的荧光图像或者通过计算机分析荧光图像以判断结果。