[发明专利]通过组织培养使刺果甘草染色体加倍的方法

摘要

本发明公开了一种通过组织培养使刺果甘草染色体加倍的方法，以干燥成熟的刺果甘草种子为材料，通过种子前处理、取得无菌苗、最佳诱导愈伤组织的培养基筛选、秋水仙素处理刺果甘草愈伤组织、继代培养。通过秋水仙素诱导刺果甘草种子使染色体加倍，得到了甘草的优质种源，缓解了甘草市场供不应求的局面。

主权项

一种通过组织培养使刺果甘草染色体加倍的方法，其特征在于它包括如下步骤：A、种子前处理：选取成熟饱满、健康无病虫害的甘草种子，用98%浓硫酸浸泡39‑41min后消毒；B、取得无菌苗：取升汞处理过的刺果甘草种子用无菌水冲洗3‑4次，接种到以MS培养基为基质的瓶中，于25℃温度下暗培养3d，之后每天以2000lux强度光照10h的光暗交替处理4天，后移至26℃温度下光培养，待植株生长到6‑10cm时备用；C、培养的健壮愈伤组织：将步骤B中的无菌苗，接种到玉米素混合培养基上，于23℃条件下暗培养5d，之后每天以2000lux强度光照16h的光暗交替处理；D、处理刺果甘草愈伤组织：取步骤C培养的健壮愈伤组织，用0.05—0.2%浓度的秋水仙素处理16—24h；E、继代培养：将处理过的愈伤组织接到玉米素混合培养基上进行第一次继代培养，20d后进行第二次继代培养。