[发明专利]一种小麦胚芽细胞活性蛋白的制备方法

摘要

本发明涉及活性蛋白制备领域，特别涉及一种小麦胚芽细胞活性蛋白的制备方法，包括以下步骤采用35％的硫酸铵溶液对小麦胚芽蛋白溶液进行预沉淀，然后离心，得到上清液；采用饱和硫酸铵溶液对上清液充分沉淀，离心，得到沉淀和上清液；将沉淀溶解于PBS溶液后透析，去除硫酸铵，即得。该制备方法先选用特定浓度的硫酸铵溶液将小麦胚芽蛋白溶液中的杂蛋白如纤维蛋白、一部分糖蛋白以及一部分其它蛋白沉淀，通过离心将其去除；然后再用饱和硫酸铵溶液将上清液中的糖蛋白、糖蛋白肽以及部分生长因子沉淀，得到的沉淀即为小麦胚芽细胞活性蛋白；最后采用透析的方式将沉淀中的硫酸铵去除，即得到纯净的小麦胚芽细胞活性蛋白。

主权项

一种小麦胚芽细胞活性蛋白的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(a)、采用35％的硫酸铵溶液对小麦胚芽蛋白溶液进行预沉淀，然后离心，得到上清液；(b)、采用饱和硫酸铵溶液对上清液充分沉淀，离心，得到沉淀和上清液；(c)、将沉淀溶解于PBS溶液后透析，去除硫酸铵，即得；所述小麦胚芽蛋白溶液通过以下方法制备：(a)、将小麦子粒浸泡于蒸馏水中，28‑35℃下培养，培养的空气湿度为80％‑85％，培养2‑3d，粉碎至80‑100目，得到粉碎混合物；(b)、将所述粉碎混合物以5000r/min的转速离心，得到第一上清液；(c)、将所述第一上清液以8000r/min的转速离心，得到含有胚芽细胞的第二上清液；(d)、将所述第二上清液酶解，酶解的温度为25‑27℃，时间为1‑2h；其中，所述酶解采用的酶解液含有糖酶、蛋白酶、脂肪酶、3‑肌醇六磷酸酶；所述糖酶的添加量为所述第二上清液重量的0.8％‑1.2％；所述蛋白酶的添加量为所述第二上清液重量的0.05％‑0.1％；所述脂肪酶的添加量为所述第二上清液重量的0.4％‑0.5％；所述3‑肌醇六磷酸酶的添加量为所述第二上清液重量的0.05％‑0.15％；(e)、在0‑6℃的条件下，将酶解完成的混合物于18000r/min离心35min，得到的上清液即为小麦胚芽蛋白溶液。