[发明专利]基于核酸适配体和锰卟啉催化的化学发光检测蛋白质的方法有效
| 申请号： | 201510063506.1 | 申请日： | 2015-02-06 |
| 公开（公告）号： | CN104634775B | 公开（公告）日： | 2017-08-25 |
| 发明（设计）人： | 于聪;李文英;张青峰;陈健;周会鹏;李永新 | 申请（专利权）人： | 中国科学院长春应用化学研究所 |
| 主分类号： | G01N21/76 | 分类号： | G01N21/76;C07D487/22 |
| 代理公司： | 长春菁华专利商标代理事务所(普通合伙)22210 | 代理人： | 南小平 |
| 地址： | 130022 吉林*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种基于核酸适配体和锰卟啉催化的化学发光检测蛋白质的方法，解决现有技术中基于核酸适配体的蛋白质检测的方法存在着灵敏度低，稳定性差，步骤繁琐，成本高等缺点的技术问题。方法，包括以下步骤(1)制备锰卟啉探针；(2)蛋白质检测向化学反应器中加入20mM Tris‑HCl，25μM鲁米诺和0.05％Triton X‑100，再加入锰卟啉探针，最后加入包含核酸适配体和待测蛋白质的溶液；将所述化学反应器放入化学发光检测器中，最后用微量进样器加入浓度为100mM的H2O2，记录化学发光随时间的变化。该方法是基于核酸适配体诱导的锰卟啉集聚建立的快速、灵敏、特异、简便的蛋白质的检测方法。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 核酸 适配体 卟啉 催化 化学 发光 检测 蛋白质 方法 | ||
【主权项】：
一种基于核酸适配体和锰卟啉催化的化学发光检测蛋白质的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)制备锰卟啉探针在50mL的容量瓶中加入5,10,15,20‑四(1‑甲基‑4‑吡啶基)卟啉101mg，MnCl2·4H2O 16mg，将其溶解于10mL甲醇中，在氮气保护下加热回流进行配位反应，配位反应完成后用氯离子交换树脂交换24小时，然后用乙酸乙酯沉淀，过滤，得到的紫黑色固体在真空烘箱中烘干，制备得到锰卟啉探针；合成路线如下：(2)蛋白质检测向化学反应器中加入20mM Tris‑HCl，25μM鲁米诺和0.05％Triton X‑100，再加入锰卟啉探针，最后加入包含核酸适配体和待测蛋白质的溶液；将所述化学反应器放入化学发光检测器中，最后用微量进样器加入浓度为100mM的H2O2，记录化学发光随时间的变化。
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