[发明专利]一种长白仔猪睾丸支持细胞永生系的建立方法有效
| 申请号： | 201510065430.6 | 申请日： | 2015-02-06 |
| 公开（公告）号： | CN104673742B | 公开（公告）日： | 2017-12-29 |
| 发明（设计）人： | 张守全;白银山;冯美莹;卫恒习;李莉 | 申请（专利权）人： | 华南农业大学 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 北京众合诚成知识产权代理有限公司11246 | 代理人： | 龚燮英 |
| 地址： | 510642 广东省广州市天*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种长白仔猪睾丸支持细胞永生系的建立方法，包括步骤取长白仔猪睾丸组织，获取高比例的长白仔猪睾丸支持细胞以后，完全培养基培养1～2h后更换新鲜培养液，继续培养，最后传代至细胞形态均一的F3代的睾丸成纤维细胞；利用携带Large T和Egfp基因的慢病毒液侵染成纤维细胞，获得特征的并且表达Egfp和支持细胞标记的细胞株；使用优化的培养液培养传代超过50代以后，获得长白仔猪睾丸支持细胞永生系。本发明的长白仔猪睾丸支持细胞永生系体外传代次数已超过90代，对比市场上已建立猪睾丸传代ST细胞，本发明永生化的长白仔猪支持细胞系维持了原代的支持细胞生物学特征，更适合支持细胞的生物学性质研究，可以应用于疫苗开发和药物筛选等方面研究。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 仔猪 睾丸 支持 细胞 永生 建立 方法 | ||
【主权项】：
一种长白仔睾丸支持细胞永生系建立用的培养液，其特征在于，所述培养液为：添加了12～18％FBS，50～60μMβ‑巯基乙醇，0.8～1.2％ITS，0.8～1.2％L‑谷氨酰胺，0.8～1.2％核苷酸，45～55μg/mL维生素C和0.8～1.2％双抗的DMEM培养基。
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