[发明专利]一种构建肿瘤多药耐药细胞模型的方法及通过该法建立的人乳腺癌多药耐药细胞株有效
申请号: | 201510075926.1 | 申请日: | 2015-02-13 |
公开(公告)号: | CN104745531B | 公开(公告)日: | 2017-10-27 |
发明(设计)人: | 岑娟;张峰;姬汴生;刘路;刘芳芳;邹玉 | 申请(专利权)人: | 河南大学 |
主分类号: | C12N5/09 | 分类号: | C12N5/09 |
代理公司: | 郑州立格知识产权代理有限公司41126 | 代理人: | 涂连梅 |
地址: | 475001*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | 本发明属于肿瘤生物学领域,涉及一种体外构建肿瘤多药耐药细胞模型的方法,包括以ROS为孵育药物对敏感肿瘤细胞进行持续培养、使敏感肿瘤细胞产生多药耐药的步骤。同时还涉及通过该法建立的人乳腺癌多药耐药细胞株,该细胞株命名为MCF‑7/ROS,保藏在中国典型培养物保藏中心,地址中国,武汉,武汉大学,430072;保藏日期2015年1月28日;保藏编号为CCTCC‑C201520。本发明提供的方法过程简单,造模条件稳定,可显著降低造模成本,具有广泛的适用性。以此建立的MCF‑7/ROS细胞株可作为研究相关机制、靶点探索和新药筛选的优势实验模型。 | ||
搜索关键词: | 一种 构建 肿瘤 耐药 细胞 模型 方法 通过 建立 乳腺癌 细胞株 | ||
【主权项】:
一种构建肿瘤多药耐药细胞模型的方法,其特征在于,包括以ROS为孵育药物对敏感肿瘤细胞进行持续培养、使敏感肿瘤细胞产生多药耐药的步骤;所用ROS为H2O2,所述敏感肿瘤细胞为人乳腺癌细胞MCF‑7;所述方法的具体步骤是:(1)细胞培养:选择对化疗药物敏感的肿瘤细胞株人乳腺癌细胞MCF‑7,调整细胞浓度,分组培养备用;(2)构建耐药模型:选用对数生长期的该种肿瘤细胞,调整细胞浓度,使用浓度0.1μmol/L的ROS持续培养肿瘤细胞,培养时间为20周,培养过程中按生长情况传代;(3)耐药性跟踪指导的循环培养:每隔2‑3周对步骤(2)中的ROS培养细胞进行耐药倍数评价;重复执行步骤(2)的相关操作,直到评价结果提示细胞产生的耐药性符合预期;冻存细胞。
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