[发明专利]一种细胞系法检测热原的方法及其试剂盒

摘要

本发明公开了一种细胞系法检测热原的方法和试剂盒。所述的方法包括以下的步骤(1)制备热原物质的标准溶液和待检样品的溶液；(2)将步骤(1)所述的热原物质的标准溶液或待检样品的溶液分别加入含有HL‑60细胞的细胞培养液中培养，取培养后细胞的上清液；(3)检测步骤(2)所述细胞的上清液中细胞因子IL‑6的含量。所述的方法能够模拟人体对热原的反应，并对革兰氏阴性菌来源、革兰氏阳性菌来源和酵母来源的热原物质进行定性和定量分析，灵敏度高，简单易行。所述的试剂盒包括热原物质的标准溶液、细胞因子IL‑6的检测试剂和HL‑60细胞；所述试剂盒操作简便，能够对热原物质进行定性和定量分析，灵敏度高。

主权项

一种细胞系法检测热原的方法，其特征在于，其包括以下的步骤：（1）制备热原物质的标准溶液和待检样品的溶液；（2）将步骤（1）所述的热原物质的标准溶液或待检样品的溶液分别加入含有HL‑60细胞的细胞培养液中培养，取培养后细胞的上清液；所述的培养时间为1~3天；所述的细胞培养液为含0.5~20%胎牛血清的IMDM培养液；所述的HL‑60细胞的细胞密度为5×106个/mL~5×107个/mL；所述的HL‑60细胞是经过传代培养的HL‑60细胞，所述的传代培养的代数为所述HL‑60细胞复苏后5~20代，所述的传代培养包括以下的步骤：将HL‑60细胞用含10~25%胎牛血清的IMDM培养液培养，每2~3天更换所述的细胞培养液一次，即可；所述热原物质的标准溶液或所述待检样品的溶液与所述细胞培养液的体积比为1:1~1:4；所述的百分比为胎牛血清占IMDM培养液的体积百分比；（3）检测步骤（2）所述细胞的上清液中细胞因子IL‑6的含量。