[发明专利]基于核酸适配体检测汞离子的生物传感器及其制备方法

摘要

本发明提供了一种基于核酸适配体检测汞离子的生物传感器，在电极上依次修饰有HAP2层、HAP1和Probe1层；同时提供了其制备方法，本发明提供的生物传感器性能稳定，电极的重复性好，适用于食品安全中汞离子的检测和生物传感器产业化的实际应用。

主权项

一种基于核酸适配体检测待测目标物汞离子的生物传感器，其特征在于，在金电极上依次修饰有HAP2层、HAP1和Probe1层；HAP2层的厚度为15±2nm、HAP1和Probe1层的厚度为10±2nm；所述生物传感器的制备方法，包括以下步骤：(1)对金电极进行预处理；(2)将HAP2层修饰到电极表面；(3)将HAP1和Probe1层修饰到电极表面；步骤(2)将HAP2层修饰到电极表面的操作步骤如下：将1.0μM的HAP2滴加10μL到经过预处理的电极表面，在25℃下孵育2h；步骤(3)将HAP1和Probe1层修饰到电极表面的操作步骤如下：a)将灭菌水，1X的buffer缓冲液、HAP1、Probe1、核酸外切酶Ⅲ和待测目标物加入离心管中，震荡30s，放入37℃的恒温箱中孵育2h；b)将孵育好的混合溶液滴加到修饰好HAP2层的电极上，将电极继续放在37℃的恒温箱中孵育2h，清洗；HAP1和Probe1层中HAP1、Probe1、核酸外切酶Ⅲ的摩尔与活性的比为1:1:250，其中，HAP1和Probe1的单位为摩尔，核酸外切酶Ⅲ的单位为活性单位；所述Probe1的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；所述HAP1的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示；所述HAP2的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示。