[发明专利]一种活体诱导南高丛越橘四倍体的方法

摘要

本发明公开了一种活体诱导南高丛越橘四倍体的方法，南高丛越橘（Vaccinium australe）具有抗逆性强、生长速度快、产量高等优点。多倍体作为植物进化的途径之一,一般具有巨大性、低孕性、生长旺盛、大果、茎杆粗壮、抗逆性强等特点,且相对常规杂交育种而言,多倍体育种周期较短，能较快的得到一个植物的新品种。本发明以组培苗生根苗为材料，采用活体诱导法对南高丛越橘组培苗进行四倍体诱导，获得了抗逆性强、优质、高产、单果大的南高丛越橘植株，为培育适应热带及亚热带的大果型越橘新品种奠定基础。

主权项

一种活体诱导南高丛越橘四倍体的方法，其特征在于包括以下步骤：（1）组培苗的生根：取高3～5cm高，生长健壮的南高丛越橘组培苗接种到生根培养基中进行诱导生根,接种后先在25～28℃条件下全暗培养10～20天，然后置于每天光照14～16小时，光照强度为3000～5000lx，培养温度为25～28℃的条件下培养至生根；（2）炼苗移栽：根长至1～2cm试管苗的培养瓶瓶盖打开在室外于自然光照下炼苗2～4天后将试管苗从培养瓶中取出，洗掉根部培养基，尽量不伤害根部，栽入微酸性基质中并定植于大田中，移栽1个月内保持空气湿度80%以上；（3）多倍体诱导：将步骤（2）精心管理待其正常生长45～60天后，选择茎尖生长旺盛的幼苗作为活体诱导材料,在幼苗生长旺盛的时段，用脱脂棉包裹其新芽,然后用不同浓度的诱变剂对其进行滴定处理12～48h,为防止其蒸发,用透明小拱棚遮盖幼苗,正常光照,并每隔3～6h滴定一次,保持脱脂棉湿润,处理后除去脱脂棉,揭开小拱棚,用清水冲洗幼苗5～10次,洗掉残余药液,在正常条件下进行田间管理；（4）芽体生根：将步骤（3）处理的芽长到3～5cm的枝条进行形态鉴定，并取茎尖旁幼叶用去壁低渗‑火焰干燥法对其进行染色体计数,同时剪取其枝条,扦插于微酸性基质中，扦插1个月内保持空气湿度90%以上，芽体开始生根，生出新芽后，取新芽旁边的幼叶进行染色体计数,统计变异率及多倍体比例。