[发明专利]一种基于核酸外切酶和G四聚体的分子检测方法及检测试剂盒有效
申请号: | 201510102244.5 | 申请日: | 2015-03-09 |
公开(公告)号: | CN104726573B | 公开(公告)日: | 2017-03-29 |
发明(设计)人: | 陈俊华;周顺桂;温俊林 | 申请(专利权)人: | 广东省生态环境与土壤研究所 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/44 |
代理公司: | 广州嘉权专利商标事务所有限公司44205 | 代理人: | 郑莹 |
地址: | 510650 *** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种基于核酸外切酶和G四聚体的分子检测方法及检测试剂盒。分子与核酸适体相互作用,启动链置换反应,打开茎环结构DNA,再与核酸外切酶介导的信号放大技术结合,从而可以产生大量的具有活性的G四聚体结构。G四聚体与hemin结合,从而具有HRP的催化活性,催化氧化TMB,产生蓝色底物,结果肉眼可见,分子的浓度与蓝色深浅直接相关。本发明操作简单,可在室温下完成整个反应,具有较高的灵敏度,对17β‑雌二醇的检测限为1 pM,具有很好的特异性,检测结果直接肉眼可见,无需检测仪器,可用于分子的实地现场快速检测。 | ||
搜索关键词: | 一种 基于 核酸外切酶 四聚体 分子 检测 方法 试剂盒 | ||
【主权项】:
一种基于核酸外切酶和G四聚体的17β‑雌二醇分子检测试剂盒,包括TMB显色缓冲液、氯高铁血红素、DNA杂交缓冲液,其特征在于:所述试剂盒还包括核酸外切酶Ⅲ和如下核酸序列:DNA1:5'‑GCTTCCAGCTTATTGAATTACACGCAGAGGGTAGCGGCTCTGCGCATTCAATTGCTGCGCGCTGAAGCGCGGAAGC‑GCAGAT‑GGGTTGGGATTACGATAGATAATA‑3';DNA2:5'‑ATCTGCGCTTCCGCGCTTATAATA‑3';DNA3:5'‑GGGTAGGGCGGGTTGGG‑ATTACGATAGTCCAATCACAACCTATCGTAATCCCAACCC‑ATCTGC‑3'。
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