[发明专利]同时检测CYVCV和CCDaV的一步法PCR检测引物对、试剂盒及方法有效
申请号: | 201510103671.5 | 申请日: | 2015-03-10 |
公开(公告)号: | CN104745725B | 公开(公告)日: | 2017-08-25 |
发明(设计)人: | 周彦;陈洪明;王雪峰;李中安;周常勇 | 申请(专利权)人: | 西南大学柑桔研究所 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/94 |
代理公司: | 重庆市前沿专利事务所(普通合伙)50211 | 代理人: | 郭云 |
地址: | 400712 重*** | 国省代码: | 重庆;85 |
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摘要: | 本发明提供了一种同时检测CYVCV和CCDaV的一步法PCR检测引物对、试剂盒及方法。引物对包括CYVCV检测引物对CYVCV‑4f/CYVCV‑‑4r;CCDaV检测引物对CCDV‑2f/CCDV‑2r;COX基因检测引物对Ant1/Sen1。同时检测CYVCV和CCDaV的一步法PCR检测方法,包括步骤(1)提取柑橘待测样品的总核酸;(2)将提取到的总核酸进行多重PCR扩增;(3)对扩增产物进行检测是否含有CYVCV、CCDaV和COX基因的扩增片段,从而判断样品是否感染CYVCV或CCDaV。本发明方法检测特异性强,灵敏度高,稳定性好,工序简单,节约成本,适用于大规模推广。 | ||
搜索关键词: | 同时 检测 cyvcv ccdav 一步法 pcr 引物 试剂盒 方法 | ||
【主权项】:
一种同时检测CYVCV和CCDaV的一步法PCR检测引物对,其特征在于:包括CYVCV检测引物对:CYVCV‐4f/CYVCV‐4r;CCDaV检测引物对:CCDV‐2f/CCDV‐2r;COX基因检测引物对:Ant1/Sen1;所述引物对的序列如下:CYVCV‐4f:5’‐ATTACAGTGGTAGGGAGGAG‐3’,CYVCV‐4r:5’‐CCCAGCAGGACGAGTTAG‐3’,CCDV‐2f:5’‐ACAAGACTATCATAGCACGAGACG‐3’,CCDV‐2r:5’‐TTTGAACTGTTTAAGTCCATCCC‐3’,Ant1:5’‐CAATATCATTGATGTCCAATACT‐3’,Sen1:5’‐ATTTATGTAATGGATTTAAGACCC‐3’。
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