[发明专利]一种普利卡那肽的制备方法

摘要

本发明公开了一种普利卡那肽的制备方法，包括以下步骤1)由Fmoc‑Leu‑树脂载体采用Fmoc固相合成方法按普利卡那肽的多肽序列顺序由碳端向氮端逐一偶联得到侧链基团保护的肽树脂；2）肽树脂依次按Cys4‑Cys12、Cys7‑Cys15分别脱保护后定向成环，获得全保护的普利卡那肽肽树脂；3）采用裂解试剂裂解侧链基团保护的肽树脂，4）脱盐后纯化、冻干得到普利卡那肽。本发明采用的普利卡那肽制备工艺方法具有实际的工业化应用前景和可观的经济实用价值。

主权项

一种普利卡那肽的制备方法，包括以下步骤:1）按普利卡那肽的序列，在Fmoc‑Leu‑树脂载体上由碳端向氮端逐一偶联Cys、Gly、Thr、Cys、Ala、Val、Asn、Val、Cys、Leu、Glu、Cys、Glu、Asp、Asn，制备得到线性普利卡那肽的肽树脂，其中，Cys侧链保护基分别是StBu、Mmt和Acm，Thr、Glu、Asp、Asn侧链保护基分别是tBu、OtBu、OtBu和Trt；2）肽树脂在巯基乙醇的DMF溶液中反应，洗涤，然后加入过量的2,2’‑二硫双（5‑硝基吡啶）的DCM溶液反应，洗涤后加入TFA的含TIS的DCM溶液反应，进行第一次环化；3）经过一次环化的肽树脂在I2溶液中脱除7位、15位的Acm保护基，第二次环化；4）肽树脂采用切割试剂将普利卡那肽从树脂上分离，得到粗肽，经过分离纯化获得普利卡那肽纯品；所述线性普利卡那肽的肽树脂在树脂上直接成环，环化方法为：肽树脂在体积百分数10‑50%巯基乙醇的DMF溶液中反应1‑10h；然后加入5‑20倍量DTNP的DCM溶液1h；洗涤后加入体积百分数0.5‑5%TFA的含体积百分数1‑10%TIS的DCM溶液反应20min，进行一次环化；树脂经过洗涤后，加入5‑100倍当量I2的DMF溶液反应0.5‑5h，进行二次环化。