[发明专利]一种以CYP2E1为靶点的药物筛选方法在审
申请号: | 201510104457.1 | 申请日: | 2015-03-10 |
公开(公告)号: | CN104774911A | 公开(公告)日: | 2015-07-15 |
发明(设计)人: | 张小莺;王萌;陈琛 | 申请(专利权)人: | 陕西理工学院 |
主分类号: | C12Q1/26 | 分类号: | C12Q1/26;C12Q1/02 |
代理公司: | 北京世誉鑫诚专利代理事务所(普通合伙) 11368 | 代理人: | 郭官厚 |
地址: | 723000 陕*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | 本发明涉及一种以CYP2E1为靶点的药物筛选方法,其包括如下步骤:S1获取动物的新鲜组织并剪碎,然后加入缓冲溶液进行匀浆,直至浆料为粉红色均一的组织混悬液为止,得到生物活性匀浆孵育体系;S2将所需检测的药物进行稀释后,再将需检测的药物加入到步骤S1所得的生物活性匀浆孵育体系中进行孵育;S3对S2所得的生物活性均匀浆孵育体系进行二次匀浆,待所述生物活性均匀浆孵育体系与药物作用结合后,通过提取生物活性均匀浆孵育体系的线粒体方式提取所述生物活性均匀浆孵育体系的CYP2E1;S4检测步骤S3的线粒体中CYP2E1的表达和活性。本发明具有方法简单、避免药物干扰、节省实验动物等优点。 | ||
搜索关键词: | 一种 cyp2e1 药物 筛选 方法 | ||
【主权项】:
一种以CYP2E1为靶点的药物筛选方法,其特征在于,包括如下步骤:S1获取动物的新鲜组织并剪碎,然后加入缓冲溶液进行至少一次的匀浆,直至浆料为粉红色均一的组织混悬液为止,得到生物活性匀浆孵育体系;S2将所需检测的药物进行稀释成10‑10~10‑1mg/mL后,再按照需检测的药物:生物活性匀浆孵育体系=1:10的体积比将需检测的药物加入到步骤S1所得的生物活性匀浆孵育体系中进行孵育;S3对S2所得的生物活性均匀浆孵育体系进行二次匀浆,待所述生物活性均匀浆孵育体系与药物作用结合后,通过提取生物活性均匀浆孵育体系的线粒体方式提取所述生物活性均匀浆孵育体系的CYP2E1;S4检测步骤S3的线粒体中CYP2E1的表达和活性。
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