[发明专利]一种双miRNA抑制表达载体及其构建方法和应用有效
| 申请号： | 201510115310.2 | 申请日： | 2015-03-17 |
| 公开（公告）号： | CN104711259B | 公开（公告）日： | 2017-12-08 |
| 发明（设计）人： | 龙瑞才;李明娜;丛丽丽;杨青川;康俊梅;张铁军 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12N15/113;C12N15/84;A01H5/00 |
| 代理公司： | 北京双收知识产权代理有限公司11241 | 代理人： | 卢新 |
| 地址： | 100193 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种双miRNA抑制表达载体及其构建方法和应用，本发明以Seq1和Seq2为引物经重叠延伸PCR反应，获得8～10个Seq1重复排列的序列Seq3。将Seq3序列片段连接到pEASAY‑T1克隆载体上，得到克隆载体pEASAY‑T1‑Seq3，经酶切后将序列片段Seq3进一步连接到植物表达载体pBIGFP上，获得双miRNA抑制表达载体pBIGFP‑Seq3，本发明所述的双miRNA抑制表达载体起到抑制苜蓿Ms‑miR393和Ms‑miR398活性的作用。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 mirna 抑制 表达 载体 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种部分重叠的互补引物对，其特征在于：其核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示。
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