[发明专利]一种快速检测核酸的方法

摘要

本发明属于生物技术领域，特别是涉及一种快速检测核酸的方法。本发明利用ELISA微孔板进行切刻内切酶核酸恒温扩增，通过ELISA检测目标基因探针末端地高辛量，从而对目标基因进行定性和定量分析，能够快速检测核酸。利用核酸恒温扩增技术与一步法ELISA结合，能在不依赖PCR仪器的前提下，简单，快速的完成核酸检测，在各种微生物及病原检测中具有良好的应用前景。

主权项

 一种快速检测核酸的方法，其特征在于，包括以下各步骤：（1）将预先包被5ug/ml 地高辛的聚苯乙烯微孔板作为核酸恒温扩增的反应容器；（2）将目标基因的互补片段作为探针3’标记生物素，5’端标记地高辛；（3）将标记后的探针通过生物素与链亲和素磁珠反应结合；（4）带有标记探针的磁珠与随后加入的样品DNA/RNA在聚苯乙烯微孔板中采用ELISA法，55℃反应30min，通过N.BstNBI 切刻内切酶恒温扩增，探针末端地高辛随扩增次数被酶切割，溶液中地高辛浓度成比例增加；（5）将磁珠吸出加入HRP标记的地高辛抗体，37℃反应30min,洗涤，加显色底物TMB，溶液显色通过检测吸光值计算DIG浓度，根据标准质粒的浓度从而确定目的基因的量。