[发明专利]一种应用切向流超滤技术制备孕马血清促性腺激素的方法

摘要

本发明公开了一种应用切向流超滤技术制备孕马血清促性腺激素的方法，(1)将孕马原血浆加入偏磷酸，取上清液；(2)将上清液通入截留2万分子量的中空纤维柱进行切向流超滤，得到收集液；(3)收集液加入冷乙醇，得到上清液；(4)上清液中加入乙醇，离心后收集沉淀；(5)沉淀用灭菌生理盐水进行稀释，通入小型超滤器内的截留分子量1万的TFF膜包，浓缩即得。本发明提供的制备方法应用切向流超滤技术，浓缩的滤液体积可达10～20倍，大大降低了生产成本，缩短了生产周期，产品质量好。

主权项

一种应用切向流超滤技术制备孕马血清促性腺激素的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将待提取的孕马原血浆放入容器内，在搅动的同时加入0.5当量的偏磷酸至pH值为3.5，滤过，取上清液；(2)调节上清液的pH值为5.8，然后将上清液通入截留2万分子量的中空纤维柱进行切向流超滤，得到收集液，至收集液的蛋白浓度为5.0mg/ml时终止；(3)将步骤(2)得到的收集液加入浓度为95％的冷乙醇至终浓度35％，pH值为5.3，以4000rpm进行离心，得到沉渣和上清液ⅰ，收集上清液ⅰ并暂放0～5℃的环境下；在离心后得到的沉渣中加入35％的缓冲酒精进行搅拌溶解，再以4000rpm进行离心，得到上清液ⅱ，合并上清液ⅰ和上清液ⅱ；(4)步骤(3)合并后得到的上清液中加入浓度为95％的乙醇，二者混合后终浓度为75％，调节pH值为4.0，然后在0～5℃放置2小时以上，再以4000rpm进行离心，收集沉淀；(5)步骤(4)收集的沉淀用灭菌生理盐水进行稀释，调节pH值为6.0～7.0，通入小型超滤器内的截留分子量1万的TFF膜包，浓缩至所需体积，即得孕马血清促性腺激素。