[发明专利]一株转化乳糖废水合成乳糖酸的密孔菌及转化方法

摘要

本发明提供一株用于转化乳糖废水制备乳糖酸的密孔菌，其分类命名为密孔菌(Pycnoporus sp.)SYBC-L10，已保藏于中国典型培养物保藏中心，地址为中国武汉武汉大学，保藏编号为CCTCC NO：M2015020。用密孔菌(Pycnoporus sanguineus)SYBC-L10微生物作为菌种，以乳糖废水为转化底物，添加氮源、无机盐及诱导剂组成发酵培养基，微生物转化制备乳糖酸。在发酵过程中通过添加琥珀酸缓冲液，使得发酵过程中pH保持恒定，提高乳糖废水的转化率，优化条件下转化率达到85％以上。对于乳糖酸的研究，我国在此方面的研究尚属空白。本发明转化的乳糖废水中，根据高效液相色谱法检测其中的乳糖含量为25％左右。

主权项

一株转化乳糖废水合成乳糖酸的密孔菌及转化方法，其特征在于利用分类命名为密孔菌(Pycnoporus sp.)SYBC‑L10，保藏编号CCTCC NO： M 2015020的密孔菌转化乳糖废水制备乳糖酸，工艺为：(1)菌种：采用CCTCC NO： M 2015020为出发菌株；(2)菌种保藏：所用菌株在保藏培养基上保藏，3‑6个月转接一次；保藏培养基：PDA培养基；(3)种子培养：从保藏培养基转入种子培养基需活化1次，每次30℃下培养4d；(4)微生物转化：将CCTCC NO： M 2015020菌株添加到发酵培养基中，利用微生物产的纤维二糖脱氢酶和漆酶将乳糖转化为乳糖酸；发酵培养基的组分以g/L计为：碳源20‑50，有机氮源6‑10，无机氮源4‑10，磷酸二氢钾1，硫酸镁0.3，氯化钙0.08，七水硫酸锌0.005，四水硫酸锰0.0015，六水氯化钴0.0015七水硫酸铁0.005；所述的碳源为乳糖废水中乳糖，所述的氮源为有机氮源黄豆粉，无机氮源为磷酸氢二铵；转化底物乳糖在发酵培养基中的浓度为3％‑5％W/V，种子液以10％的接种量，接入添加不同氮源以及无机盐组成的发酵培养基中，250mL三角瓶装液量为50mL；在28‑30℃，200‑220rmp的条件下培养7d，得到含乳糖酸的发酵液；(5)在发酵过程中通过添加琥珀酸缓冲液，使得发酵过程中pH4.5‑5.0保持恒定，以此提高乳糖废水的转化率。