[发明专利]人3型腺病毒展示载体高通量构建方法

摘要

本发明公开了一种人3型腺病毒展示载体高通量构建方法，旨在于提供一种基于Goldgen gate技术的人3型腺病毒展示载体高通量构建方法；其技术方案是：所述方法包括以下步骤：1)将PCR片段或者合成的核酸片段，纯化后稀释测定浓度；2)转移至96孔Golden gate反应预制板，与配置在所述96孔Golden gate反应预制板混合液进行Golden gate反应；3)反应产物转移至感受态细胞板中，进行Golden gate反应产物转化；4)将细胞转移至大型LB固体培养基上，分离单克隆抗体；5)挑取单克隆抗体，并培养后转移至96孔PCR克隆鉴定预制板，进行Golden gate反应产物克隆鉴定；6)转移至96深孔板中，培养后提取克隆质粒，并测定克隆质粒浓度；7)将质粒送测序；属于生物医学技术领域。

主权项

一种人3型腺病毒展示载体高通量构建方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：1)将PCR片段或者合成的核酸片段，纯化后稀释测定浓度20ng‑50ng/ul；2)将步骤1)的PCR片段或者合成的核酸片段转移至96孔Golden gate反应预制板，与配置在所述96孔Golden gate反应预制板混合液进行Golden gate反应；3)将步骤2)Golden gate反应产物转移至感受态细胞板中，进行Golden gate反应产物转化；4)将步骤3)Golden gate反应产物转化后的细胞转移至大型LB固体培养基上，分离单克隆抗体；5)挑取步骤4)制备的单克隆抗体，并培养后转移至96孔PCR克隆鉴定预制板，进行Golden gate反应产物克隆鉴定；6)将步骤5)鉴定后的阳性克隆转移至96深孔板中，培养后提取克隆质粒，并测定克隆质粒浓度；7)将质粒送测序。