[发明专利]一种用于检测石斑鱼虹彩病毒感染的DNA核酸适配体及其筛选方法和应用在审
| 申请号： | 201510126068.9 | 申请日： | 2015-03-20 |
| 公开（公告）号： | CN104789570A | 公开（公告）日： | 2015-07-22 |
| 发明（设计）人： | 秦启伟;李鹏飞;魏世娜;杨敏;周伶俐;俞也频 | 申请（专利权）人： | 中国科学院南海海洋研究所 |
| 主分类号： | C12N15/115 | 分类号： | C12N15/115;C12N15/10;C12Q1/70;C12R1/93 |
| 代理公司： | 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 | 代理人： | 朱聪聪;刘明星 |
| 地址： | 510301 *** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开一种用于检测石斑鱼虹彩病毒感染的DNA核酸适配体及其筛选方法和应用。在每轮筛选过程中，引入两次反筛的步骤，首先将前一轮的单链DNA文库与正常细胞结合，以去除与正常石斑鱼细胞结合的非特异ssDNA，然后将上清与被石斑鱼虹彩病毒感染的细胞进行结合筛选，从被石斑鱼虹彩病毒感染的细胞上分离得到的ssDNA，然后再和正常细胞结合，分离得到上清。PCR扩增文库制备出单链的DNA文库。重复以上的筛选流程，与第一轮筛选的正常细胞数目相比，将筛选过程中正常细胞的数目提高2-6倍，与第一轮筛选的文库与细胞的结合时间相比，在随后的筛选过程中，文库与正常细胞结合时间从0.5h增加至1h，文库与病毒感染细胞结合时间从1h缩短至0.5h，以提高每轮的筛选效率。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 用于 检测 石斑鱼 虹彩 病毒感染 dna 核酸 适配体 及其 筛选 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种用于检测石斑鱼虹彩病毒感染的DNA核酸适配体，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，所述的核苷酸序列上结合有用于检测的标记。
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