[发明专利]一种从三七根际土壤提取分离化感自毒物质的方法

摘要

本发明公开一种从三七根际土壤提取分离化感自毒物质的方法，包括土壤样品采集，处理，称取经处理的土壤样品20g，用甲醇提取，超声处理，用高效液相色谱法对化感自毒物质进行分离，色谱条件为：色谱仪为Agilent 1260，色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18、250mm×4.6mm、5μm，流动相A为质量分数为0.1％的H₃PO₄水溶液，流动相B为甲醇,流速1.0ml/min，柱温25℃，检测波长203nm，并进行梯度洗脱。经实验证明，本发明方法提取分离获得的化感自毒物质种类最多，且这种方法简便易行，减少了对样品提取过程中繁复提取工艺造成的提取溶剂对样品中目标化合物的干扰和损失。

主权项

一种从三七根际土壤中提取分离化感自毒物质的方法，其特征在于：(1)土壤样品采集：通过交叉五点法在种植三七三年的土地中进行土壤采集，取三七植株根际土壤样品；(2)土壤样品处理：将步骤(1)所采集的土壤样品带回室内，风干，除杂，过1‑2mm筛，装入自封袋中，贴上标签，待用；(3)称取经步骤(2)处理的土壤样品20g，置于200ml甲醇中，所述甲醇为分析纯，超声处理30min；用滤纸过滤，收集滤液，所收集的滤液即为提取得到的化感自毒物质提取液，于4℃保存，待测；(4)将步骤(3)所保存的滤液用高效液相色谱法进行分离，色谱条件为：色谱仪为Agilent 1260，色谱柱为Agilent Zorbax SB‑C18、250mm×4.6mm、5μm，流动相A为质量分数为0.1％的H₃PO₄水溶液，流动相B为甲醇,所述甲醇为色谱纯，流速1.0ml/min，柱温25℃，检测波长203nm，并按如下表1所述梯度洗脱参数进行梯度洗脱，分离得到的单个色谱峰对应的物质即代表具有化感自毒效应的单个化合物，表1 梯度洗脱参数表时间(min)流动相A溶液v/v(％)流动相B溶液v/v(％)09010208020656040704060754060。