[发明专利]一种具有除磷功能的恶臭假单胞菌P.PAO‑1及驯化培养方法有效
| 申请号： | 201510148391.6 | 申请日： | 2015-03-31 |
| 公开（公告）号： | CN104745512B | 公开（公告）日： | 2017-06-30 |
| 发明（设计）人： | 田晴;朱艳彬;谢学辉;杨波;李方;秦华星;张成;王康伟;黄娜;庄林杰;孟丹杰;王琦 | 申请（专利权）人： | 东华大学 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12N1/36;C12R1/40 |
| 代理公司： | 上海泰能知识产权代理事务所31233 | 代理人： | 黄志达 |
| 地址： | 201620 上海市*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种具有除磷功能的恶臭假单胞菌P.PAO‑1及驯化培养方法，所述恶臭假单胞菌pseudomonas P.PAO‑1的保藏编号为CGMCC No.8073，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。培养将恶臭假单胞菌P.PAO‑1的菌种接种于5‑10ml灭菌富集培养基预培养，然后再接种于100‑200ml灭菌富集培养基内，在30℃条件下，震荡培养12‑24h，清洗，离心，重悬浮形成菌液；然后再进行厌氧、好氧交替培养驯化，得到驯化菌。本发明通过富集‑驯化二阶段培养模式培养，在P.PAO‑1菌株体内形成聚羟基丁酸的初始积累，并应用于低浓度含碳有机废水处理中，实现高效除磷的目的。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 具有 功能 恶臭 假单胞菌 pao 驯化 培养 方法 | ||
【主权项】：
一种具有除磷功能的恶臭假单胞菌P.PAO‑1的驯化培养方法，包括：(1)将恶臭假单胞菌P.PAO‑1的菌种接种于5‑10ml灭菌富集培养基预培养，然后再接种于100‑200ml灭菌富集培养基内，在30℃条件下，震荡培养12‑24h，清洗，离心，重悬浮形成菌液，菌液OD为1.0‑1.3；其中恶臭假单胞菌(pseudomonas sp.)P.PAO‑1的保藏编号为：CGMCC No.8073，其16S rRNA序列如SEQ ID NO.1所示；富集培养基为每L含3g牛肉膏、10g蛋白胨、5g NaCl、0.02g KH2PO4，及微量元素；(2)将菌液转移至装有100‑200ml灭菌富碳限氮驯化培养基A的容器中，控制菌液细菌细胞浓度约为1.5g干细胞/L，通入氮气5‑30min赶尽容器内空气，并将其置于30℃、120r·min‑1的摇床上厌氧培养10‑12h；然后将菌液离心、洗涤，重悬浮于富磷无碳的灭菌驯化培养基B中，通入无菌空气好氧培养8‑12h后结束本轮厌氧/好氧循环，重复上述厌氧/好氧循环3‑5次，得到驯化菌；其中富碳限氮驯化培养基A为：每L含4.92g CH3COONa、13.6g KH2PO4、160mg NH4Cl、0.27mg FeSO4、184mg MgSO4、2mg CaCl2、1mL微量元素；富磷无碳的灭菌驯化培养基B为每L含13.6g KH2PO4、160mg NH4Cl、0.27mg FeSO4、184mg MgSO4、2mg CaCl2、1mL微量元素。
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