[发明专利]一种细胞培养方法

摘要

本发明属于生物技术领域，涉及一种新的细胞培养方法，适用于各种细胞，特别适用于对培养条件敏感的干细胞。本发明涉及一种动静态交替的细胞培养方法，在细胞培养过程中，在同一个培养容器进行的细胞培养至少包括静态培养的过程、载体运动的过程、培养容器两端对调的过程和细胞分布的过程。在同一细胞培养容器中构建了一种动静态交替培养的理想反应器，可以尽可能减小剪切力，避免细胞生长时聚集成团，在培养时使细胞均匀分布，并进一步避免载体在培养容器对调过程中产生横向移动，为细胞培养提供一个理想的生长代谢的环境。

主权项

一种细胞培养的方法，其特征在于A.在同一个培养容器进行的细胞培养至少包括静态培养的过程、载体运动的过程、培养容器两端对调的过程和细胞分布的过程；B.培养容器中具有载体；C.静态培养的过程中，载体分布于培养容器的一端，细胞分布在载体的表面、载体之间的空隙或培养容器内的任何部分中，与培养容器保持相对静止；D.载体运动的过程中，载体由培养容器的一端向另一端运动；E.培养容器对调的过程中，载体固定在培养容器的一端，并随培养容器的两端位置变化发生对调；F.细胞分布的过程中，载体重新位于培养容器的一端，细胞由混悬状态分布在载体的表面、载体之间的空隙或培养容器内的任何部分中；其中，所述的细胞培养过程中所用的各载体质量、体积或密度不均一；载体的直径大于1mm；载体的密度不超过8g/cm3；载体密度比培养基密度±0.02‐0.4g/cm3；载体由培养容器的一端向另一端运动，运动的速率不高于1m/s；静态培养之间的动态培养由载体运动和培养容器两端对调循环重复进行4‐20次来实现；培养容器的两端完成1次对调的时间T(s)与磁场强度B(mT)之间符合公式T≥105·B‐3；培养容器的两端完成1次对调的时间T不低于0.5s；将载体固定在培养容器一端的磁场强度不低于26mT。