[发明专利]一种快速有效的提取发育早期棉籽中油脂的方法

摘要

针对发育早期棉籽的油脂较难提取，从而不利于其脂肪酸组分的分析，本发明建立了一种有效、简便、快速的提取发育早期棉籽(花后5‑10天)中油脂的方法，该方法避免了高温及常规旋转蒸发等提取方法造成油脂中多不饱和脂肪酸组分的氧化；所提取的油脂可直接用于GC‑MS进行脂肪酸组分的鉴定与相对含量的分析，并通过在提取油脂的溶剂中增添内标的方法，对发育早期棉籽油脂的各脂肪酸组分的进行定量分析。本发明能有效快速提取棉籽中总油脂，便于分析在棉花种子发育早期，棉籽中油脂含量及其主要脂肪酸的积累等的动态变化。

主权项

一种快速有效的提取发育早期棉籽中油脂的方法，其特征在于：所述的有效快速提取方法包括以下步骤：①在棉花开花时进行挂牌标记，并标明开花日期，选择开花期发育一致的植株；②分别收集花后5天与10天的棉籽样品，并用镊子将棉籽从棉桃中取出，轻轻剥离棉籽外壳，取出棉仁收集于50ml离心管中，液氮速冻后，至‑80℃超低温冰箱中保存；③使用液氮碾磨棉仁样品，称取10μg棉仁粉末，装入进口可密闭1.5ml离心管中；④加入体积比为2∶1的氯仿‑甲醇的混合试剂0.6ml，在40℃、200r/min摇床上处理4h后，6000r/min离心10min，然后吸取油脂相层于离心管中；⑤在低温旋转真空干燥仪上蒸干至恒重，减去离心管中重，计算油脂获得率，从而避免高温及长时间的常规旋转蒸发方法造成油脂中多不饱和脂肪酸组分的氧化。