[发明专利]一种鸡白痢沙门氏菌灭活疫苗的制备方法及其应用

摘要

本发明公开了一种鸡白痢沙门氏菌灭活疫苗的制备方法及其应用，属于兽医生物制品技术领域。本发明所述的制备方法是将鸡白痢沙门氏菌菌种SP7220、SP8441和SP9905分别复苏传代后制成种子菌液，再将种子菌液进行发酵罐深层通气培养增殖，经灭活后与免疫佐剂混合，分装后制成鸡白痢沙门氏菌灭活疫苗。本发明方法简单合理、生产稳定，成本低廉，产品具有安全高效、作用迅速、保护率高、应激小、残留低、保护期长等优点，家禽免疫该疫苗后可同时预防不同亚型鸡白痢沙门氏菌引起的感染，是一种理想的鸡白痢疫苗，具有广阔的应用前景。

主权项

1.一种用于预防鸡白痢沙门氏菌的灭活疫苗的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：1)种子菌液的制备：将鸡白痢沙门氏菌菌种SP7220、SP8441和SP9905复苏繁殖后，接种平板固体培养基，37℃培养24h，挑选典型菌落接种扁瓶固体培养基，37℃培养24h后用液体培养基洗下菌苔，检验合格后作为种子菌液；所述的鸡白痢沙门氏菌SP7220、SP8441、SP9905均已于2014年10月15日在中国典型培养物保藏中心保藏，保藏编号分别为：CCTCC NO.M 2014476、CCTCC NO.M 2014477、CCTCC NO.M 2014478；2)半成品制备：将种子菌液按培养基总体积的3.0％接种，经发酵罐37℃深层通气培养12h后，收集菌液，经5000r/min离心15min去除上清液，用含有0.3％甲醛的生理盐水重新悬浮菌泥，置8℃灭活12h，制成半成品；所述的液体培养基组成为：蛋白胨15.0g、酵母浸出粉5.0g、甘油12.0ml、硫代硫酸钠5.0g、甘露醇3.0ml、可溶性淀粉6.0g、硫酸镁0.5g、氯化钙0.3g、半胱氨酸1.0g、牛胆盐5.0g、葡萄糖8.0g、蒸馏水1000m；所述的固体培养基通过液体培养基中加入1.5％纯化琼脂粉制成；3)疫苗制备：将半成品与含有0.5mg/ml壳聚寡糖、0.75mg/ml刺五加多糖和20mg/ml蜂胶的佐剂等体积充分搅拌混匀，经无菌检验和安全性检验合格后分装制成鸡白痢沙门氏菌灭活疫苗。