[发明专利]采用谷氨酸钠耐受性模型筛选达托霉素高产菌株的方法在审
申请号: | 201510172274.3 | 申请日: | 2015-04-14 |
公开(公告)号: | CN104774834A | 公开(公告)日: | 2015-07-15 |
发明(设计)人: | 俞岩青;王昆蓉;田敏;曾志刚;雷叶明;陈林 | 申请(专利权)人: | 中国医药集团总公司四川抗菌素工业研究所 |
主分类号: | C12N15/01 | 分类号: | C12N15/01;C12N13/00;C12R1/465 |
代理公司: | 成都立信专利事务所有限公司 51100 | 代理人: | 冯忠亮 |
地址: | 610052 四川省成都*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | 本发明为采用谷氨酸钠耐受性模型筛选达托霉素高产菌株的方法,解决巳有方法培养基原料来源少,成本高,达托霉素正突变株的几率小的问题。包括如下步骤:(1)初筛:将诱变处理的单孢子悬浮液稀释后涂布于含有谷氨酸钠耐受量为150—200g/L的分离培养基上培养,挑选耐谷氨酸钠的单菌落接种于斜面培养基上培养,斜面产孢后接种于种子培养基中培养后接种于含谷氨酸钠量不同的发酵培养基培养168h挑选出效价高的菌株;(2)复筛:将初筛挑选出来的菌株进行复筛,挑选出效价高的菌株即成;(3)发酵培养基试验:将效价较高的菌株进行发酵培养基试验,以确定适合该突变菌株的最佳发酵培养基配方。 | ||
搜索关键词: | 采用 谷氨酸 耐受 模型 筛选 霉素 高产 菌株 方法 | ||
【主权项】:
采用谷氨酸钠耐受性模型筛选达托霉素高产菌株的方法,包括如下步骤:(1)初筛:将诱变处理的玫瑰孢链霉菌单孢子悬浮液稀释后涂布于含有谷氨酸钠耐受量为150—200 g/L的分离培养基上,在30℃培养箱中培养7—10天,挑选耐谷氨酸钠的单菌落接种于斜面培养基上,30℃培养7—10天,斜面产孢后接种于种子培养基中,30℃培养48h后接种于含谷氨酸钠量不同的发酵培养基,30℃培养168h后测定效价,挑选出效价高的菌株;(2)复筛:将效价较高的菌株接种于种子培养基中,30℃培养48h后,挑选菌丝生长良好的菌株接种于含谷氨酸钠量不同的发酵培养基中,30℃培养168h后测定效价;(3)发酵培养基试验:将效价较高的菌株进行发酵培养基试验,将(2)中培养好的种子接到含谷氨酸钠量不同的的发酵培养基中,接种量为5%,V/V,30℃培养168h后测定效价,挑选出效价高的菌株即成,或者将(2)中培养好的种子接到含谷氨酸钠量为3或5或10或15 g/L的发酵培养基中,接种量为5%,V/V,30℃培养168h后即成。
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