[发明专利]一种番茄植株顶芽内源激素含量的测定方法

摘要

本发明公开了一种番茄植株顶芽内源激素含量的测定方法，包括以下步骤：1)供试番茄顶芽样品前处理；2)配制流动相、设置色谱条件；3)标准液的制备；4)专属性考察；5)线性关系考察；6)样品含量测定；步骤1)的方法包括提取、石油醚萃取后进行减压蒸发，再调节pH，并经乙酸乙酯萃取后，最后经二次减压蒸发制成样品待测液；步骤2)中流动相为甲醇与0.075％冰乙酸配制而成。本发明提供的HPLC法测定番茄顶芽内源激素含量的方法，可快速、准确、同时测定4种植物内源激素的含量，具有测定快速、高效、高灵敏度、高自动化的特点；进行加标回收率实验，平均回收率为99.85％，RSD小于1.56％，符合激素测定要求。

主权项

一种番茄植株顶芽内源激素含量的测定方法，其特征在于：包括以下步骤：1)供试番茄顶芽样品前处理；2)配制流动相、设置色谱条件；3)标准液的制备；4)专属性考察；5)线性关系考察；6)样品含量测定；所述步骤1)的方法包括提取、石油醚萃取后进行减压蒸发，再调节pH，并经乙酸乙酯萃取后，最后经二次减压蒸发制成样品待测液；具体方法包括：1‑1)提取：供试番茄顶芽样品1g加入80％冷甲醇中，于4℃下静置16h浸提，抽滤得清液，得粗提取液；1‑2)石油醚萃取：将所述粗提取液用等体积石油醚萃取，弃去醚相，合并水相；1‑3)减压蒸发：将步骤1‑2)所得的所述水相在37℃下旋转蒸发至所述水相体积的1/3～1/4，得一次浓缩液；1‑4)调节pH：将所述一次浓缩液调节pH至2.75～2.85之间；1‑5)乙酸乙酯萃取：将调节好pH的一次浓缩液用等体积乙酸乙酯萃取，弃去水相，合并酯相；1‑6)二次减压蒸发：将步骤1‑5)所得的所述酯相在37℃下旋转蒸发至所述酯相体积的1/4～1/5，得二次浓缩液，用甲醇定容至所述二次浓缩液体积的2倍，制成样品待测液，保存于4℃下棕色瓶中，待测；所述步骤2)中流动相为甲醇与0.075％冰乙酸按体积比为45：55配制而成；色谱条件设置为检测波长210nm，流速为0.7mL/min，进样量为20μL；所述标准液和所述样品含量测定的植物激素包括IAA、ZT、ABA和GA₃；所述标准液包括：0.1g/L的IAA标准液、0.001g/L的ZT标准液、0.001g/L的ABA标准液和0.01g/L的GA₃标准液。