[发明专利]一种核酸核糖体结合体系构建方法及应用在审
| 申请号： | 201510173632.2 | 申请日： | 2015-04-14 |
| 公开（公告）号： | CN104774801A | 公开（公告）日： | 2015-07-15 |
| 发明（设计）人： | 陈齐斌;滕晓红;吴德喜;杨永红;苏发武;赵明富;马晓东;李重九 | 申请（专利权）人： | 云南农业大学 |
| 主分类号： | C12N5/04 | 分类号： | C12N5/04;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 昆明知道专利事务所(特殊普通合伙企业) 53116 | 代理人： | 姜开侠;谢乔良 |
| 地址： | 650201 *** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种核酸核糖体结合体系构建方法及应用。所述的核酸核糖体结合体系构建方法是在经0.1%DEPC处理过的500μl的离心小管中于0~5℃加入12μl核糖体麦胚抽提溶液，再依次加入1ul RNAsin(40U/ul，Takara)，2ul含100mM KAC,4mM Mg(AC)2,20mM Hepes, 20mM DTT的溶液，1ul 1mM/each 20种氨基酸标准混合液（promega），2.5ul 10mM ATP,1ul 10mM GTP,0.5ul 2mM 放线菌酮，1.5ul 8mM磷酸肌酸, 1ug TMV-RNA,0.5ul磷酸肌酸激酶，用DEPC处理水补至25μl，离心后置于23~26℃下14~16min，然后转置于0~5℃条件下得到核酸-核糖体结合体系。应用为所述的核酸核糖体结合体系构建方法用于研究药物筛选的应用。本发明构建的核酸核糖体结合体系可应用于病毒核酸-核糖体结合抑制的药物筛选研究。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 核酸 核糖体 结合 体系 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种核酸核糖体结合体系构建方法，其特征在于所述的核酸核糖体结合体系构建方法是在经0.1%DEPC处理过的500μl的离心小管中于0~5℃加入12μl核糖体麦胚抽提溶液，再依次加入1ul RNAsin(40U/ul，Takara)，2ul含100 mM KAC, 4mM Mg(AC)2, 20mM Hepes, 20mM DTT的溶液，1ul 1mM/each 20种氨基酸标准混合液（promega），2.5ul 10mM ATP, 1ul 10mM GTP,0.5ul 2mM 放线菌酮，1.5 ul 8mM磷酸肌酸, 1ug TMV‑RNA, 0.5ul磷酸肌酸激酶，用DEPC处理水补至25μl，离心后置于23~26℃下14~16min，然后转置于0~5℃条件下得到核酸‑核糖体结合体系。
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