[发明专利]一种海洋光合细菌规模化生产方法

摘要

本发明公开了一种海洋光合细菌规模化生产方法，包括需氧不需光发酵过程和光厌氧发酵过程两个阶段；首先是在需氧不需光的发酵过程中，海洋光合细菌菌种与需氧不需光发酵阶段培养基按1∶（5‑20）的体积比混合后置于发酵容器中发酵，发酵液的溶氧分压为50%‑100%饱和溶氧分压，细胞密度OD₆₆₀达0.8以上后停止发酵；第二阶段的光厌氧发酵过程中，将第一阶段发酵液按照1：（3–15）的体积比通入到透明无菌的管道中，采用光厌氧培养基，发酵过程光强要求1200‑8000Lux之间，每天光照时间在8‑24小时；当菌体的浓度OD₆₆₀大于1.2，且OD₆₆₀每天的增长量小于0.1时，终止发酵。本发明具有发酵时间短，设备简单，投资少，发酵光合细菌菌液浓度高，质量好，过程可控的易于大规模生产的特点。

主权项

一种海洋光合细菌规模化生产方法，其特征在于包括需氧不需光发酵过程和光厌氧发酵过程两个阶段；首先是在需氧不需光的发酵过程中，海洋光合细菌菌种与需氧不需光发酵阶段培养基按1∶（5‑20）的体积比混合后置于发酵容器中发酵，发酵温度为20‑40℃，发酵时间为24‑48小时，发酵液的溶氧分压为50%‑100%饱和溶氧分压，发酵过程pH控制在6.3‑8.0之间，细胞密度OD₆₆₀达0.8以上后停止发酵；第二阶段的光厌氧发酵过程中，将第一阶段发酵液按照1：（3–15）的体积比通入到透明无菌的管道中进行光厌氧发酵过程，发酵条件为：温度为15‑40℃，发酵时间为2‑15天，采用光厌氧培养基，发酵过程需要光照不需通气充氧，光强要求1200‑8000lux之间，每天的光照时间在8‑24小时；当菌体的浓度OD₆₆₀大于1.2，且OD₆₆₀每天的增长量小于0.1时，终止发酵；所述需氧不需光发酵阶段培养基的营养成分及质量百分比为：乙酸钠：0.15‑0.5%、酵母粉：0.0001‑0.5%、蛋白胨：0.001‑0.5%、氯化铵：0.01‑0.2%、糖：0.0001‑2%、H₂PO₄^‑：0.001‑1%、Fe³⁺：0.00001‑0.01%，培养基其余成分为无污染的海水或者人工海水，培养基的pH介于6.0‑7.5之间，培养基接种发酵前需要经115‑121℃高温灭菌20‑30分钟；所述需氧不需光发酵过程在有光或无光条件下发酵；所述光厌氧培养基的成分及质量百分比为：乙酸钠：0.15‑0.5%、酵母粉：0.0001‑0.1%、蛋白胨：0.0001‑0.1%、氯化铵：0.0001‑0.1%、H₂PO₄^‑：0.0001‑0.01%、 Fe³⁺： 0.00001‑0.001%，培养基其余成分为无污染的海水或人工海水，培养基pH 介于6.0‑7.5之间。