[发明专利]一种海星优质卵子的促熟和人工受精方法

摘要

本发明提供了一种海星优质卵子的促熟和人工受精方法，包括（1）海星亲本的培育；（2）海星雌雄性腺组织的采集；（3）采用终浓度为2µM的1‑甲基鸟嘌呤促熟海星卵子；（4）海星的人工受精。本发明首次建立了海星优质卵子的获得和人工受精方法，通过实验筛选到海星卵子最适促熟剂和促熟时间。本发明具有操作方便，高效、实用的特点，不会伤害亲体，卵子的获取不受季节限制；在棘皮动物生殖生物学和实验胚胎学研究方面具有重要的应用价值和推广应用前景。

主权项

一种海星优质卵子的促熟和人工受精方法，其特征在于它包括以下步骤：（1）海星亲本的培育将海星亲本置于15～16℃恒温的水族箱内培养，培养期间投喂小型浮游动物，2～3天投喂一次，4～6天换水100%；（2）海星性腺组织的采集分别采集海星臂雌性性腺中的卵液和雄性性腺中的精液；（3）海星卵子的人工促熟向采集到的所述卵液中加入终浓度为2µM的1‑甲基鸟嘌呤，置于16℃培养箱中，用摇床摇动1～2h后卵子成熟；采用新鲜海水洗涤卵子备用；（4）人工受精将采集到的所述精液用海水稀释50～100倍得精子稀释液，吸取所述精子稀释液加入到2×103～5×103个卵子中，再加入30～50mL海水，轻轻摇动5～10分钟，在解剖镜下观察受精效果，卵膜举起，表明受精完成。