[发明专利]一种腺病毒实时荧光定量PCR试剂盒

摘要

一种腺病毒实时荧光定量PCR试剂盒，涉及生物技术领域中的PCR试剂盒。本试剂盒包括腺病毒的一对特异性引物、一条特异性荧光探针、阳性对照、阴性对照、5xPCR Buffer和Enzyme Mix；设计特异性引物F和R：5'-AGCCACGGTGGGGTTTCTAAACTT，5'-GGCCCCAGTGGTCTTACATGCACATCC-3'；设计探针FP：Cy5-ATGCACCAGACCCGGGCTCAGGTACTCCGA-BHQ-2。本发明检测时间周期短、检测效率高；检测病毒特异性高，准确率高；在进行病毒定性分析的同时还能进行病毒定量分析；检测灵敏度比普通PCR和免疫学检测方法灵敏度高；操作简单、易于推广；实验结果重复性好。

主权项

一种腺病毒实时荧光定量PCR试剂盒，其特征在于：本试剂盒包括腺病毒的一对特异性引物、一条特异性荧光探针、阳性对照、阴性对照、5×PCR Buffer和Enzyme Mix；①特异性引物F：5'‑AGCCACGGTGGGGTTTCTAAACTTT‑3'，R：5'‑GGCCCCAGTGGTCTTACATGCACATCC‑3'；②荧光探针FP：Cy5‑ATGCACCAGACCCGGGCTCAGGTACTCCGA‑BHQ‑2，荧光探针5’端标记荧光报告基团Cy5，3’端标记荧光淬灭基团BHQ‑2；③阳性对照腺病毒标准品；④阴性对照RNase Free H₂O；⑤5×PCR Buffer配制       Tris·Cl          20mM       KCl               80mM（NH₄）₂SO₄                   80mM   DTT                1.5mM   MgCl₂             12mM   dNTP              10mM   配置混合后于冰箱‑20℃保存；⑥Enzyme Mix配制        Tris·Cl           20mM        KCl                80mM    DTT                 1mM    EDTA                0.1mM    Nonidet P‑40        0.5％    Tween 20            0.5％    甘油                 50％    Taq酶               2.5U/ul    配置混合后于冰箱‑20℃保存。