[发明专利]一种氨氧化古菌实时荧光定量PCR的引物及检测方法在审
申请号: | 201510185444.1 | 申请日: | 2015-04-17 |
公开(公告)号: | CN104762300A | 公开(公告)日: | 2015-07-08 |
发明(设计)人: | 高景峰;樊晓燕;潘凯玲;司春英;孙丽欣;李洪禹 | 申请(专利权)人: | 北京工业大学 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12Q1/68;C12Q1/06 |
代理公司: | 北京汇信合知识产权代理有限公司 11335 | 代理人: | 陈圣清 |
地址: | 100124 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了一种氨氧化古菌的实时荧光定量PCR检测方法,包括以下步骤:步骤1,引物的合成,其中,引物的序列为:正向引物AOA_amoA_F:5'-TTCTACACAGACTGGGCGTG-3';反向引物AOA_amoA_R:5'-GTTAGGTCCAAAAGCATCGC-3';步骤2,普通PCR、克隆与测序鉴定引物的特异性;步骤3,标准品质粒的制备;步骤4,实时荧光定量PCR反应体系和反应程序的建立;步骤5,标准曲线的绘制:步骤6,实时荧光定量PCR检测方法的评价。本发明的有益效果为:实时荧光定量PCR引物的特异性强,实时荧光定量PCR的检测方法具有灵敏度高、重复性及稳定性和准确性好,简便快速,可同时实现对于不同环境样品中氨氧化古菌的定量,对于研究氮循环及环境样品中的氨氧化过程具有重要意义。 | ||
搜索关键词: | 一种 氧化 实时 荧光 定量 pcr 引物 检测 方法 | ||
【主权项】:
一种氨氧化古菌实时荧光定量PCR的引物,其特征在于,引物的序列如下:正向引物AOA_amoA_F:5'‑TTCTACACAGACTGGGCGTG‑3';反向引物AOA_amoA_R:5'‑GTTAGGTCCAAAAGCATCGC‑3'。
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